Confirmación de Pythium insidiosum como agente etiológico de la Granulomatosis Enzoótica Bovina mediante análisis de secuencia
Document title: Confirmación de Pythium insidiosum como agente etiológico de la Granulomatosis Enzoótica Bovina mediante análisis de secuencia
Journal: Salus
Database: PERIÓDICA
System number: 000342951
ISSN: 1316-7138
Authors: 1
1
2
3
4
Institutions: 1Universidad de Carabobo, Facultad de Ciencias de la Salud, Maracay, Aragua. Venezuela
2Clínica Lugo, Laboratorio Delgado Launois, Maracay, Aragua. Venezuela
3Michigan State University, Medical Technology Program, East Lansing, Michigan. Estados Unidos de América
4Universidad de Carabobo, Instituto de Investigaciones Biomédicas, Maracay, Aragua. Venezuela
Year:
Volumen: 12
Pages: 110-115
Country: Venezuela
Language: Español
Document type: Artículo
Approach: Aplicado
Spanish abstract La Granulomatosis Enzoótica Bovina (GEB) es una enfermedad que afecta al ganado bovino en regiones de sabana inundable de Venezuela. El agente etiológico de la GEB ha sido identificado previamente en animales infectados como Pythium insidiosum, mediante estudios inmunológicos y de morfología microscópica. Para confirmar la identidad del microorganismo por análisis de secuencia, se tomaron muestras de tejido infectado de 20 bovinos y se aisló ADN genómico total. La secuencia correspondiente al ADNr 18S fue amplificada mediante PCR usando cebadores previamente reportados (NS1 y NS8). El segmento amplificado (1,8 kpb) fue clonado en el plásmido pCR®2.1-TOPO® y expandido en células de E. coli transformadas. El ADN recombinante recuperado fue secuenciado y se comparó con secuencias reportadas para P. insidiosum y otras especies del género Pythium: P. myriotylum, P. monospermum, P. Ro21 y P. spinosum. El alineamiento múltiple de las secuencias demostró una identidad total del segmento amplificado con la secuencia de referencia para P. insidiosum, y diferencias significativas con las demás secuencias incluidas en el análisis. Estos resultados, junto a las evidencias previas, demuestran que el agente etiológico de la GEB en los bovinos estudiados es Pythium insidiosum. Este hallazgo tiene implicaciones importantes pues la enfermedad puede ocasionar grandes pérdidas económicas y su agente causal puede infectar también a humanos (causando Pythiosis humana). Por lo tanto, es necesario caracterizar las cepas de P. insidiosum que se encuentran en el país y emprender la producción de vacunas inmunoterapéuticas y el desarrollo de tratamientos específicos
English abstract Enzootic bovine granulomatosis (EBG) is a disease that affects bovine cattle in the flooded Savanna regions of Venezuela. The etiologic agent was previously identified as Pythium insidiosum by means of microscopic morphology and immunological methods. To confirm the identity of the microorganism by sequence analysis, infected tissue samples were taken from 20 bovines and total genomic DNA was isolated. The sequence corresponding to rDNA 18S was amplified by PCR using previously reported primers (NS1 and NS8). The amplified segment (1.8 kbp) was cloned in the plasmid pCR®2.1-TOPO® and expanded in transformed E. coli cells. The recovered recombinant DNA was sequenced and compared with reported sequences for P. insidiosum and other species of the genus Pythium: P. myriotylum, P. monospermum, P. Ro21 and P. spinosum. Multiple alignment analyses revealed a total identity of the amplified segment with the reference sequence of P. insidiosum, as well as significant differences with the other sequences included. These results, together with the previous evidence, demonstrate that the etiologic agent of EBG in the infected animals studied is indeed Pythium insidiosum. This finding has important implications because the disease causes high economic loses and the causative agent can also infect humans (causing human Phytiosis). Therefore, it is necessary to characterize the strains of P. insidiosum found in the country and begging projects of an immunotherapeutic vaccine production and development of specific treatments
Disciplines: Medicina,
Biología
Keyword: Microbiología,
Salud pública,
Bovinos,
Pythium insidiosum,
Granulomatosis,
Pitiosis,
Secuenciación,
Reacción en cadena de la polimerasa (PCR)
Keyword: Medicine,
Biology,
Microbiology,
Public health,
Bovines,
Pythium insidiosum,
Granulomatosis,
Pythiosis,
Sequencing,
Polymerase chain reaction (PCR)
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