| Journal: | Revista costarricense de ciencias médicas |
| Database: | PERIÓDICA |
| System number: | 000350997 |
| ISSN: | 0253-2948 |
| Authors: | Chaves Chavarría, Alicia1 Vargas Umaña, Marianela1 Schosinsky Nevermann, Karl1 Jiménez Díaz, Manuel1 |
| Institutions: | 1Universidad de Costa Rica, Facultad de Microbiología, San José. Costa Rica |
| Year: | 1997 |
| Season: | Mar |
| Volumen: | 18 |
| Number: | 1 |
| Pages: | 30-43 |
| Country: | Costa Rica |
| Language: | Español |
| Document type: | Proyecto técnico |
| Approach: | Descriptivo |
| Spanish abstract | Se evaluó un método enzimático colorimétrico para la cuantificación de colesterol sérico, basado en la reacción de Trinder. La técnica consiste en mezclar 2,0 mL de reactivo de trabajo previamente preparado, con 20 µ L de suero. La absorbancia es leída a 500 nm contra blanco de reactivos después de 15 minutos de incubación a 37º C. El intervalo analítico es de 25 a 600mg/dL. La comparación de los resultados con el método de colesterol total en suero por extracción dio una regresión lineal de Y = -0,4223 + 0,8907(X), con un coeficiente de correlación (r) de 0,958 y una desviación estándar sobre la línea de regresión (Sy/x) de 24 mg/dL. Con el método Colesterol Fast Color se obtuvo una regresión lineal de Y = 19,5 + 1,02 (X), un coeficiente de correlación (r) de 0,972 y una desviación estándar sobre la línea de regresión de 13 mg/dL. Con el método Colestat la regresión lineal fue de Y = 25 + 1,000 (X) con un coeficiente de correlación (r) de 0,983 y una desviación estándar sobre la línea de regresión lineal de 16 µg/dL. Las precisiones día a día para muestras con valores de colesterol bajos, normales y altos mostraron coeficientes de variación de 1,8; 1,9 y 1,5 por ciento y en un mismo día de 2,3; 3,3 y 2,4 por ciento respectivamente. La hemoglobina y el ácido acetilsalicílico en concentraciones de 50 mg/dL no bilirrubina produce una interferencia de 0,42 por ciento. El reactivo de trabajo almacenado en botella ámbar es estable por al menos 3 semanas a 2- 8º C. El reactivo es estable por lo menos un año si la solución concentrada de enzimas se almacena en congelación a –70º o en forma liofilizada, y por al menos dos meses a + 4º C. Las concentraciones óptimas incluyen 1,5 mmol/L de 4-aminofenazona, 0,5 g/L de Triton X-100, 3 mmol/L de colato de sodio, 16 m mol/L de fenol, 1000 U/L de peroxidasa, 250 U/L de colesterol oxidasa y 500 U/L de colesterol esterasa |
| English abstract | A colorimetric method based on the Trinder reaction for use in enzymatic determination of serum cholesterol is evaluated. Two mL of working reagent, previously prepared, is mixed with 20 µK if serum and the absorbance is read against blank reagent at 500nm, after 15 minutes of incubation al 37º C. The analytical range is 25 to 600 mg/dL. Comparisons of results with total serum cholesterol by extraction gave a linear regression of Y= -0.4223 + 0.8907 (X), with a correlation coefficient (r) of 0.958 and a standard error (Sy/x) of 24 mg/dL. Comparisons with results by Colesterol Fast Color gave a linear regression of Y= 19.5 + 1.02 (X), a correlation coefficient (r) of 0.972 and a standard error (Sy/x) of 13 mg/dL and comparisons with results by Colestat gave a linear regression of Y = 19.5 + 1.02(X), a correlation coefficient (r) of 0.972 and standard error (Sy/x) of 13 mg/dL. Hemoglobin and acetylsalicylic acid do not interfere up to 50 mg/dL. L-ascorbic acid interferes equimolecularly and one mg/dL of bilirrubin causes and interference of 0.42 percent. The working reagent, stored in an amber-colored bottle, is stable for at least 3 weeks at 2-8º C. The reagent is stable for at least one year if the concentrated enzime solution is stored lyophilized or at –70º C, and ofr at least twomonths al +4º C. The optimun reagent concentration includes 4-aminophenazone 1,5 mmol/L, Triton X-100 0.5 g/L, sodium cholate 3,0 mmol/L potassium ferrocyanide 16 µmol/L, phenol 15 mmol/L, peeroxidase 1000 U/L, cholesterol oxidase 250 U/L and cholesterol ester hydrolase 500 U/L |
| Disciplines: | Medicina |
| Keyword: | Diagnóstico, Metabolismo y nutrición, Colesterol, Lípidos, Enfermedad coronaria, Cuantificación |
| Keyword: | Medicine, Diagnosis, Metabolism and nutrition, Cholesterol, Lipids, Coronary artery disease, Quantification |
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