Isolation and partial purification of beta-galactosidases from cotyledons of two cowpea cultivars



Document title: Isolation and partial purification of beta-galactosidases from cotyledons of two cowpea cultivars
Journal: Revista brasileira de fisiologia vegetal
Database: PERIÓDICA
System number: 000279380
ISSN: 0103-3131
Authors: 1



Institutions: 1Universidade Federal do Ceara, Centro de Ciencias, Fortaleza, Ceara. Brasil
Year:
Volumen: 13
Number: 3
Pages: 251-261
Country: Brasil
Language: Inglés
Document type: Artículo
Approach: Experimental
English abstract Three isoforms of beta-galactosidases were isolated and partially purified from the cotyledons of quiescent seeds of Vita 3 and Vita 5 cowpea [Vigna unguiculata (L.) Walp.] cultivars differing in water and salt stress tolerance. The purification procedure consisted of ammonium sulfate fractionation, acid precipitation, ion exchange chromatography through DEAE-sephadex and affinity chromatography through Lactosyl-sepharose columns. The three isoforms isolated from the two cultivars showed the same chromatographic patterns, same optimum of temperature for enzyme activity assay (60ºC), identical thermal stability up to 50°C, and similar pH optima (3-4). However, they differed from each other in sensitivity towards metal ions and certain chemical agents presents in the assay medium. The results have shown that the observed differences in beta-galactosidases from the cotyledons of quiescent seeds were not sufficient to relate them to stress tolerance
Portuguese abstract Três isoformas da enzima beta-galactosidase foram isoladas e purificadas parcialmente a partir de cotilédones de sementes quiescentes dos cultivares Vita 3 e Vita 5 de feijão-de-corda [Vigna unguiculata (L.) Walp.], os quais diferem em tolerância aos estresses hídrico e salino. O processo de purificação consistiu de fracionamento com sulfato de amônio, precipitação ácida, seguida pela associação de cromatografia de troca iônica em coluna de DEAE-Sephadex com cromatografia de afinidade em coluna de Lactosyl-Sepharose. As três isoformas isoladas dos dois cultivares mostraram os mesmos padrões cromatográficos, mesma temperatura ótima de ensaio para atividade enzimática (60ºC), idêntica estabilidade térmica até 50ºC e apresentaram ótimos de pH semelhantes (3-4). Entretanto, diferiram umas das outras em suas sensibilidades a íons metálicos e a certos agentes químicos presentes no meio de reação. Os resultados mostraram que as diferenças observadas nas beta-galactosidases de cotilédones de sementes quiescentes foram insuficientes para correlacioná-las com a tolerância ao estresse
Disciplines: Química,
Biología,
Agrociencias
Keyword: Bioquímica,
Fisiología vegetal,
Leguminosas,
Vigna unguiculata,
Cotiledones,
Isoenzimas,
Variedades,
Estrés salino
Keyword: Chemistry,
Biology,
Agricultural sciences,
Biochemistry,
Plant physiology,
Legumes,
Vigna unguiculata,
Cotyledons,
Isozymes,
Cultivars,
Salt stress
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