| Journal: | Fitopatologia brasileira |
| Database: | PERIÓDICA |
| System number: | 000295761 |
| ISSN: | 0100-4158 |
| Authors: | Marchi, Carlos E1 Brommonschenkel, Sergio H Queiroz, Marisa V. de2 Mizubuti, Eduardo S.G |
| Institutions: | 1Universidade Federal de Vicosa, Departamento de Fitopatologia, Vicosa, Minas Gerais. Brasil 2Universidade Federal de Vicosa, Departamento de Microbiologia, Vicosa, Minas Gerais. Brasil |
| Year: | 2006 |
| Season: | May-Jun |
| Volumen: | 31 |
| Number: | 3 |
| Pages: | 254-260 |
| Country: | Brasil |
| Language: | Portugués |
| Document type: | Artículo |
| Approach: | Experimental, analítico |
| English abstract | To investigate insertional mutagenesis in Magnaporthe grisea, we tested the transformation of protoplasts produced after protocol optimization, and analyzed the integration efficiency of pAN7-1 into the M. grisea genome mediated by the restriction endonuclease Hind III. The I-22 protoplasts were readily transformed for hygromycin resistance. When pAN7-1 was linearized with Hind III and used to transform fungal protoplasts in the presence of the corresponding enzyme, the transformation efficiency was increased 1.1 to 8.1-fold. The optimal Hind III concentration for enhanced transformation corresponded to 5 unit/transformation mix. This concentration led to average frequency of 332 transformants/µg de pAN7-1/10(7) protoplasts. The presence of selection gene hph in the 18 transformant genome was confirmed by PCR |
| Portuguese abstract | Visando explorar a mutagênese insercional em Magnaporthe grisea, foram avaliadas a transformação dos protoplastos obtidos após adequação do protocolo e a eficiência da integração de pAN7-1 no genoma do ascomiceto na presença da enzima de restrição Hind III. Os protoplastos de M. grisea I-22 foram prontamente transformados para a resistência à higromicina. Quando o vetor linearizado com Hind III foi usado para transformar o fungo na presença de Hind III, a eficiência de transformação foi 1,1 a 8,1 vezes superior ao tratamento sem a adição da enzima. No geral, a melhor concentração de Hind III foi 5 unidades/reação de transformação. Tal concentração promoveu a produção média de 332 transformantes/µg de pAN7-1/10(7) protoplastos. A presença do gene de seleção hph no genoma de 18 indivíduos resistentes à higromicina foi confirmada por PCR |
| Disciplines: | Agrociencias |
| Keyword: | Hongos, Genética, Bioquímica, Magnaporthe grisea, Mutagénesis, Protoplastos, Enzimas de restricción, Genoma, Pyricularia grisea, Pyricularia oryzae |
| Keyword: | Agricultural sciences, Fungi, Genetics, Biochemistry, Magnaporthe grisea, Mutagenesis, Protoplasts, Pyricularia grisea, Pyricularia oryzae, Restriction enzymes, Genome |
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