Extracción in situ de ADN genómico para el análisis por PCR de regiones de interés en cuatro especies vegetales y un hongo filamentoso
Document title: Extracción in situ de ADN genómico para el análisis por PCR de regiones de interés en cuatro especies vegetales y un hongo filamentoso
Journal: Biotecnología vegetal
Database: PERIÓDICA
System number: 000413250
ISSN: 1609-1841
Authors: 1
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Institutions: 1Universidad Central "Marta Abreu" de Las Villas, Instituto de Biotecnología de las Plantas, Santa Clara, Villa Clara. Cuba
2Universidad Central "Marta Abreu" de Las Villas, Facultad de Ciencias Agropecuarias, Santa Clara, Villa Clara. Cuba
Year:
Season: Jul-Sep
Volumen: 14
Number: 3
Pages: 151–154-151–154
Country: Cuba
Language: Español
Document type: Nota breve o noticia
Approach: Experimental
Spanish abstract Los métodos de extracción de ADN genómico son generalmente trabajosos y peligrosos para la salud humana y el medio ambiente por el uso de solventes orgánicos (cloroformo y fenol). En este trabajo se valida un protocolo de extracción in situ de ADN genómico por lisis alcalina. Se empleó con el objetivo de amplificar regiones del ADN en cuatro especies de plantas y de un hongo mediante la reacción en cadena de la polimerasa (PCR). Se utilizó material vegetal de Saccharum officinarum L., Carica papaya L., Digitalis purpurea L. de los cuales se logró extender diferentes regiones del genoma a través de PCR. Fue posible amplificar un fragmento del gen avr-4 de ADN purificado a partir de micelio liofilizado de Mycosphaerella fijiensis Morelet. Adicionalmente, se logró amplificar la región del transgen ap24 insertado en el genoma de banano cv. ‘Grande naine’ (Musa AAA)
English abstract The extraction methods of genomic DNA are usually laborious and hazardous to human health and the environment by the use of organic solvents (chloroform and phenol). In this work a protocol for in situ extraction of genomic DNA by alkaline lysis is validated. It was used in order to amplify regions of DNA in four species of plants and fungi by polymerase chain reaction (PCR). From plant material of Saccharum officinarum L., Carica papaya L. and Digitalis purpurea L. it was possible to extend different regions of the genome through PCR. Furthermore, it was possible to amplify a fragment of avr-4 gene DNA purified from lyophilized mycelium of Mycosphaerella fijiensis. Additionally, it was possible to amplify the region ap24 transgene inserted into the genome of banana cv. ‘Grande naine’ (Musa AAA)
Disciplines: Biología,
Agrociencias
Keyword: Genética,
Hongos,
Fitopatología,
Mycosphaerella fijiensis,
ADN genómico,
PCR,
Carica papaya,
Digitalis purpurea,
Musa,
Saccharum officinarum
Keyword: Biology,
Agricultural sciences,
Fungi,
Genetics,
Phytopathology,
Mycosphaerella fijiensis,
Genomic DNA,
PCR,
Carica papaya,
Digitalis purpurea,
Musa,
Saccharum officinarum
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