| Journal: | Biotecnología aplicada |
| Database: | PERIÓDICA |
| System number: | 000348455 |
| ISSN: | 0864-4551 |
| Authors: | García, Darien1 Yero, Daniel1 Niebla, Olivia1 Cobas Karem1 Perera, Yasser1 Caballero, Evelin1 Delgado, Maite1 Pajón, Rolando1 |
| Institutions: | 1Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología, División de Vacunas, Cubanacán, La Habana. Cuba |
| Year: | 2012 |
| Volumen: | 29 |
| Number: | 1 |
| Pages: | 22-28 |
| Country: | Cuba |
| Language: | Inglés |
| Document type: | Artículo |
| Approach: | Descriptivo, aplicado |
| Spanish abstract | Las infecciones producidas por el serogrupo B de Neisseria meningitidis constituyen un serio problema de salud mundial que no puede ser prevenido mediante la vacunación. En este artículo reportamos un análisis del genoma de la cepa MC58 de N. meningitidis desarrollado con el objetivo de identificar nuevos posibles candidatos vacunales. Los genes anotados como ‘Hipotéticos’ e ‘Hipotéticos conservados’, en conjunto con aquellos que pudieran presentar funciones relacionadas con la envoltura celular, estuvieron sujetos a extensos análisis de similitud de secuencia, localización celular y de motivos y dominios complementados con curación manual. Como resultado, 35 marcos de lectura abiertos no caracterizados, predichos para codificar proteínas de superficie o relacionadas con la virulencia fueron identificados. Los candidatos fueron subdivididos en tres categorías: 1) proteínas de membrana externa (PME) únicas del género Neisseria; 2) PMEs conservadas en varios géneros y 3) proteínas homólogas a PME conocidas o a proteínas previamente reportadas como inmunogénicas en modelos animales. Dos de estos candidatos, el nmb1126 y el nmb0181 fueron clonados y expresados en Escherichia coli. Los productos resultantes fueron purificados por cromatografía de afinidad a quelatos metálicos y empleados para inmunizar ratones. Las proteínas recombinantes fueron capaces de inducir anticuerpos que reconocieron el antígeno nativo del meningococo en un panel de tres cepas y que mostraron actividad bactericida contra la cepa homóloga |
| English abstract | Neisseria meningitidis serogroup B infections are a serious health threat to the world that cannot be prevented by vaccination. Here, we report an analysis of the MC58 Neisseria meningitidis genome aimed at the identification of new potential vaccine candidates. ‘Hypothetical’ and ‘conserved hypothetical’ annotated genes, together with those with putative functions related to the cell envelope, were subjected to extensive sequence similarity searches, as well as motif, cellular location, and domain analyses complemented with manual curation. As a result, a set of 35 uncharacterized ORFs, predicted to encode for surface exposed or virulence related proteins, was identified. The candidates were subdivided in three categories: 1) predicted outer membrane proteins (OMPs) unique of the Neisseria genus; 2) conserved OMPs from various genus and 3) proteins homologous to known OMPs or to proteins previously found to be immunogenic in animal models. Two of the final candidates, nmb1126 and nmb0181, were cloned and expressed in Escherichia coli. The resulting products were purified by Metal Chelating Chromatography and used to immunize mice. The recombinant proteins were capable of inducing antibodies against the native antigen in preparations of a panel of three strains and displayed bactericidal activity against the homologous strains |
| Disciplines: | Biología, Medicina |
| Keyword: | Genética, Inmunología, Análisis genómico, Vacunas, Antígenos, Neisseria meningitidis |
| Keyword: | Biology, Medicine, Genetics, Immunology, Genomic analysis, Vaccines, Antigens, Neisseria meningitidis |
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