| Revista: | Biotecnología Aplicada |
| Base de datos: | PERIÓDICA |
| Número de sistema: | 000437456 |
| ISSN: | 0864-4551 |
| Autores: | Danielevich, Virus E1 Vladimirovich, Ivanov A1 Iusupovna, Kuchukova M1 Petrovich, Luzyanin B1 Amirkhanovich, Kubatiev A1 |
| Instituciones: | 1Institute of General Pathology and Pathophysiology, Moscú. Rusia |
| Año: | 2016 |
| Periodo: | Oct-Dic |
| Volumen: | 33 |
| Número: | 4 |
| País: | Cuba |
| Idioma: | Inglés |
| Tipo de documento: | Artículo |
| Enfoque: | Aplicado, descriptivo |
| Resumen en español | Se desarrolló un método basado en electroforesis capilar para la detección mediante luz ultravioleta de residuos de cisteína y homocisteína unidos a proteínas en plasma humano, mediante la combinación de un paso de derivatización con apilamiento mediado por pH. Las sales y los compuestos de bajo peso molecular se eliminaron de la mezcla de proteínas mediante ultracentrifugación. A continuación, la muestra se incubó con ditiotreitol para reducir los puentes disulfuro. Los compuestos derivatizados se inyectaron a la electroforesis capilar mediante su aplicación por voltaje. El efecto de apilamiento permitió una considerable preconcentración de los analitos antes de su separación. El enfoque propuesto permite alcanzar un límite de detección de 1 µmol/L en muestras de plasma sanguíneo con el empleo de un capilar no recubierto de 48.5 cm de largo y un diámetro interno de 50 µm. El coeficiente de variación del ensayo para la homocisteína y la cisteína fue de ± 5 % |
| Resumen en inglés | A capillary electrophoresis method with UV detection has been developed for the determination of protein-bound cysteine and homocysteine in human plasma based on the combination of derivatization step with pH-mediated base stacking. Centrifugal ultrafiltration was carried out to clarify plasma proteins from salts and low-molecular weight compounds. Thereafter, the sample was incubated with dithiothreitol to reduce the disulfides and release protein-bound aminothiols. The released thiols were derivatized with thiocarbonyldiimidazole and injected into the capillary electrophoresis by voltage. Due to the stacking effects it is possible to perform a considerable on-line pre-concentration of the analytes. The proposed approach allows to reach a detection limit of 1 µmol/L in blood plasma using 48.5 cm total length 50-µm i.d. uncoated capillary. The coefficient of variation of the assay was within ± 5 % |
| Disciplinas: | Medicina |
| Palabras clave: | Diagnóstico, Bioquímica, Técnicas de diagnóstico, Bioquímica clínica, Cisteína, Homocisteína, Tiocarbonildiimidazol, Electroforesis capilar, Plasma humano |
| Keyword: | Diagnosis, Biochemistry, Diagnostic techniques, Clinical biochemistry, Homocysteine, Cysteine, Thiocarbonyldiimidazole, Capillary electrophoresis, Human plasma |
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