Purificação, caracterização físico-química e atividade anticoagulante de glicosaminoglicanos isolados da pele de tilápia do Nilo (Oreochromis niloticus)
Document title: Purificação, caracterização físico-química e atividade anticoagulante de glicosaminoglicanos isolados da pele de tilápia do Nilo (Oreochromis niloticus)
Journal: Acta scientiarum. Technology
Database: PERIÓDICA
System number: 000339932
ISSN: 1806-2563
Authors: 1
2
2
2
4
3
Institutions: 1Universidade Federal do Ceara, Programa de Pos-graduacao em Biotecnologia, Fortaleza, Ceara. Brasil
2Universidade Federal do Ceara, Programa de Pos-graduacao em Bioquimica, Fortaleza, Ceara. Brasil
3Universidade Federal do Ceara, Departamento de Bioquimica e Biologia Molecular, Fortaleza, Ceara. Brasil
4Universidade Federal do Ceara, Programa de Pos-graduacao em Engenharia de Pesca, Fortaleza, Ceara. Brasil
Year:
Season: Jul-Sep
Volumen: 33
Number: 3
Pages: 233-241
Country: Brasil
Language: Portugués
Document type: Artículo
Approach: Experimental, aplicado
English abstract Glycosaminoglycans (GAGs) comprise the extracellular matrix of animal tissues, and residues from processing fish commercially harvested may offer new anticoagulant agents to substitute the heparin (HEP) in medical sciences. The aim of this study was to purify, characterize physico-chemically and evaluate the anticoagulant activity of GAGs isolated from the skin of Nile tilapia, Oreochromis niloticus. The GAGs were extracted with papain in 100 mM sodium acetate buffer (pH 5.0) containing cystein and EDTA (5 mM), followed by ion-exchange chromatography on a DEAE-cellulose column using a NaCl gradient. The obtained fractions were lyophilizated and submitted to 0.5% agarose gel electrophoresis. The anticoagulant activity was assessed by the activated partial thromboplastin time (APTT) using normal human plasma and HEP standard (193 IU mg-1). The chromatographic profile separated into two different GAGs fractions (F I and F II) eluted at 0.50 and 0.75 M of NaCl, respectively, revealing fractions pattern distinct in the charge densities, but both showing GAGs with mobilities similar to standard dermatan sulfate (DS), suggesting the preliminary identification of this GAG. The GAGs modified the APTT, whose activities were, respectively, 4.72 (F I) and 23.80 (F II) IU mg-1, and expressed themselves dose-dependent. Therefore, the anticoagulant DS from O. niloticus suggests an interesting source for posterior studies of antithrombotic activity
Portuguese abstract Os glicosaminoglicanos (GAGs) constituem a matriz extracelular de tecidos animais e os resíduos do processamento de peixes comercialmente cultivados podem oferecer novos agentes anticoagulantes em substituição à heparina (HEP) nas ciências médicas. Objetivou-se purificar, caracterizar físico-quimicamente e avaliar a atividade anticoagulante dos GAGs isolados da pele da tilápia do Nilo, Oreochromis niloticus. Os GAGs foram extraídos com papaína em tampão acetato de sódio 100 mM (pH 5,0) contendo cisteína e EDTA (5 mM), seguido por cromatografia de troca iônica em coluna de DEAE-celulose, utilizando um gradiente de NaCl. As frações obtidas foram liofilizadas e submetidas à eletroforese em gel de agarose a 0,5%. A atividade anticoagulante foi avaliada por meio do tempo de tromboplastina parcial ativada (TTPA), usando-se plasma humano normal e HEP padrão (193 UI mg-1). O perfil cromatográfico mostrou a separação de duas diferentes frações de GAGs (F I e F II), eluídas com 0,50 e 0,75 M de NaCl, respectivamente, revelando, por eletroforese, frações distintas em densidade de cargas, porém ambas mostrando GAGs com mobilidades semelhantes ao dermatam sulfato (DS) padrão, sugerindo-se a identificação preliminar desse GAG. Os GAGs modificaram o TTPA, cujas atividades perfizeram, respectivamente, 4,72 (F I) e 23,80 (F II) UI mg-1, e expressaram-se dose-dependente. Portanto, o DS anticoagulante da pele de O. niloticus sugere uma fonte interessante para estudos posteriores de atividade antitrombótica
Disciplines: Química,
Medicina
Keyword: Bioquímica,
Biotecnología,
Glucosaminoglucanos,
Purificación química,
Actividad anticoagulante,
Oreochromis niloticus,
Bioensayos
Keyword: Chemistry,
Medicine,
Biochemistry,
Biotechnology,
Glycosaminoglycans,
Chemical purification,
Anticoagulant activity,
Oreochromis niloticus,
Bioassays
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