Protocol optimization for the detection of Trypanosoma cruzi DNA in açai (Euterpe oleraceae) pulp



Document title: Protocol optimization for the detection of Trypanosoma cruzi DNA in açai (Euterpe oleraceae) pulp
Journal: Acta Amazonica
Database: PERIÓDICA
System number: 000446772
ISSN: 0044-5967
Authors: 1
2
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3
1
1
1
Institutions: 1Universidade Federal do Para, Instituto de Medicina Veterinaria, Castanhal, Para. Brasil
2Universidade Mauricio de Nassau, Belem, Para. Brasil
3Universidade Norte do Parana, Castanhal, Para. Brasil
Year:
Season: Abr-Jun
Volumen: 16
Number: 2
Pages: 79-84
Country: Brasil
Language: Inglés
Document type: Artículo
Approach: Analítico, descriptivo
English abstract Chagas disease, caused by the protozoan Trypanosoma cruzi, has often been linked to oral transmission through açai consumption. Molecular methods that allow fast and accurate identification of the pathogen are important for the detection of the presence of the parasite in this food. This study aimed to optimize polymerase chain reaction (PCR)-based detection of T. cruzi DNA in açai pulp. Several dilutions of T. cruzi DTU TcI trypomastigote forms were cultured in liver infusion tryptose (LIT) medium. Trypanosoma cruzi DNA was extracted from the cells and subjected to PCR. Subsequently, culture dilutions were added to açai pulp to evaluate the detection threshold of the optimized PCR assay. We demonstrate that our assay can detect T. cruzi DNA in açai pulp at a concentration of 1.08 × 10-10 ng µL-1. We conclude that our optimized protocol is effective and can be used as an important tool for the detection of T. cruzi contamination in açaí
Portuguese abstract A doença de Chagas, enfermidade causada pelo protozoário Trypanosoma cruzi, tem sido relacionada com frequência à transmissão oral pelo consumo de açaí. Métodos moleculares que fornecem uma identificação rápida e precisa do patógeno para a detecção da presença do parasita são de extrema importância para a detecção da presença do parasita neste alimento. Este estudo teve como objetivo otimizar a detecção de DNA de T. cruzi em polpa de açaí por meio da reação em cadeia da polimerase (PCR). Foram preparadas várias diluições das formas tripomastigotas de T. cruzi DTU TcI cultivadas em meio de cultivo Liver Infusion Tryptose. O DNA de T. cruzi foi extraído das células e submetido à PCR. Posteriormente, as diluições da cultura foram adicionadas às polpas de açaí para avaliar o limite de detecção do novo ensaio de PCR otimizado. Mostramos que nosso ensaio pode detectar DNA de T. cruzi em polpas de açaí na concentração de 1.08 × 10-10 ng µL-1. Concluímos que a metodologia desenvolvida se mostra eficaz e pode ser uma ferramenta importante para a detecção de contaminação por T. cruzi em açaí
Disciplines: Medicina
Keyword: Parasitología,
Enfermedad de Chagas,
Enfermedades transmitidas por alimentos,
Diagnóstico molecular,
Trypanosoma cruzi,
Euterpe oleraceae
Keyword: Parasitology,
Chagas disease,
Molecular diagnosis,
Foodborne disease,
Trypanosoma cruzi,
Euterpe oleraceae
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