Culture supernatants from V. cholerae O1 ElTor strains isolated from different geographic areas induce cell vacuolation and cytotoxicity



Título del documento: Culture supernatants from V. cholerae O1 ElTor strains isolated from different geographic areas induce cell vacuolation and cytotoxicity
Revue: Salud pública de México
Base de datos: PERIÓDICA
Número de sistema: 000319115
ISSN: 0036-3634
Autores: 1
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Instituciones: 1University of Pittsburgh, School of Medicine, Pittsburgh, Pensilvania. Estados Unidos de América
2Instituto Politécnico Nacional, Centro de Investigación y de Estudios Avanzados, México, Distrito Federal. México
3Instituto Politécnico Nacional, Escuela Nacional de Ciencias Biológicas, México, Distrito Federal. México
4Instituto Politécnico Nacional, Escuela Nacional de Medicina y Homeopatía, México, Distrito Federal. México
Año:
Periodo: Ene-Feb
Volumen: 51
Número: 1
Paginación: 39-47
País: México
Idioma: Inglés
Tipo de documento: Artículo
Enfoque: Analítico, descriptivo
Resumen en español Objetivo. Analizar el efecto vacuolizante de cepas de V. cholerae O1 ElTor aisladas de diferente origen geográfico, incluyendo México. Material y métodos. Se realizaron pruebas de hemolisis, vacuolización y citotoxicidad en células Vero, así como PCR, análisis por RFLP y clonación molecular. Resultados. Todas las cepas indujeron el efecto vacuolizante. Las cepas del ribotipo 2, aisladas de las costas del Golfo en Estados Unidos, presentaron títulos altos de vacuolización. El gen hlyA fue amplificado en las nueve cepas mediante PCR, aunque sólo ocho fueron hemolíticas. Se clonó el gen hlyA de una cepa toxigénica (2514-88, ctxAB+) y de una cepa no toxigénica aislada en México (CM 91-3, ctxAB-). El sobrenadante de las clonas recombinantes indujo hemólisis, efecto vacuolizante y citotoxicidad. El RFLP mostró alta similitud del gen hlyA de las cepas estudiadas. Conclusión. El efecto vacuolizante es un fenotipo ampliamente distribuido en cepas epidémicas de V. cholerae O1 biotipo ElTor
Resumen en inglés To investigate whether the HlyA-induced vacuolating effect is produced by V. cholerae O1 ElTor strains isolated from different geographic origins, including Mexico. Material and Methods. Supernatant-induced haemolysis, vacuolating activity and cytotoxicity in Vero cells were recorded. PCR, RFLP analysis and molecular cloning were performed. Results. All ElTor strains analyzed induced cellular vacuolation. Ribotype 2 strains isolates from the U.S. gulf coast yielded the highest titer of vacuolating activity. Eight of nine strains were haemolytic, while all strains were PCR positive for the hlyA gene. We cloned the hlyA gene from two ElTor strains, a toxigenic (2514-88, ctxAB+) and a non-toxigenic Mexican strain (CM 91-3, ctxAB-). Supernatant from those recombinant E. coli strains induced haemolysis, cell vacuolation and cytotoxicity. RFLP-PCR analysis revealed similarities in the hlyA gene from all strains tested. Conclusion. The HlyA-induced vacuolating effect is a widespread phenotype of epidemic V. cholerae O1 ElTor strains
Disciplinas: Medicina,
Biología
Palabras clave: Microbiología,
Bacterias,
Vibrio cholerae,
Hemolisinas,
Vacuolización,
Citotoxicidad
Keyword: Medicine,
Biology,
Microbiology,
Bacteria,
Hemolysins,
Vacuolization,
Cytotoxicity,
Vibrio cholerae
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