Evaluación de dos métodos para extracción de ARN en saliva en niños



Título del documento: Evaluación de dos métodos para extracción de ARN en saliva en niños
Revue: Revista odontológica mexicana
Base de datos: PERIÓDICA
Número de sistema: 000438693
ISSN: 1870-199X
Autores: 1
2
Instituciones: 1Universidad de Cartagena, Facultad de Odontología, Cartagena de Indias. Colombia
2Universidad de Cartagena, Facultad de Medicina, Cartagena de Indias. Colombia
Año:
Periodo: Oct-Dic
Volumen: 21
Número: 4
País: México
Idioma: Español, inglés
Tipo de documento: Artículo
Enfoque: Experimental, aplicado
Resumen en español Objetivo: Estandarizar un protocolo de extracción de ARN en muestras de saliva de niños. Material y métodos: A partir de muestras de saliva provenientes de 60 niños que participaron previa autorización de sus padres. Se compararon dos métodos para extracción de ARN, evaluando concentración, calidad y rendimiento; además se realizó la expresión génica del gen G USB a través de la técnica RT-PCR (transcriptase reversa-reacción en cadena de la polimerasa). Los datos fueron analizados mediante medidas de tendencia central y dispersión, frecuencias y porcentajes, para establecer diferencias se utilizaron las pruebas t-Student y χ2 (ρ < 0.05). Resultados: Al analizar la cantidad de células por mL de saliva se encontró una media de 564,977.8 (DE = 246,678.6); se logró estandarizar un método de extracción de ARN en saliva de niños, específicamente el que utilizó RNeasy® Protect Saliva Mini Kit-Qiagen mostró mejores características de concentración de ARN (p = 0.0000) y rendimiento (p = 0.0000) al compararlo con el que uso QlAzol®; no existieron diferencias en la calidad del ARN (p = 0.146). Conclusión: El ARN pudo extraerse de muestras salivales de niños, por lo cual se sugiere el uso de la saliva para análisis molecular de diferentes enfermedades sistémicas y de la cavidad bucal
Resumen en inglés Objective: To standardize an RNA (ribonucleic acid) extraction protocol in children's saliva specimens. Methods: The study was conducted on saliva specimens from 60 children who participated in the study with their parents' authorization. Comparison of two RNA extraction methods was established; methods assessed concentration, quality and yield. Moreover, genie expression of GUSB gene was achieved with RT-PCR (reverse transcriptase-polymerase chain reaction). Data were analyzed through measurements of central tendency and dispersion, frequencies and percentages. Т-Student and χ2 tests were used in order to differentiate between both methods (p < 0.05). Results: Analysis of cell amounts per saliva ml revealed a mean of 564,977.8 (SD = 246,678.6); a RNA in children's saliva extraction method was standardized, specifically the method using RNeasy® Protect Saliva Mini Kit Qiagen exhibited better characteristics of RNA concentration (p = 0.0000) and yield (p = 0.0000) when compared to the method using QIAzór®; no RNA (p = 0.146) quality differences were found. Conclusions: RNA could be extracted from children's saliva specimens, therefore, it is suggested to use saliva for the molecular analysis of different oral and systemic diseases
Disciplinas: Medicina
Palabras clave: Genética,
Odontología,
Bioquímica,
Saliva,
Extracción química,
ARN,
Transcriptoma,
Biomarcadores
Keyword: Genetics,
Dentistry,
Biochemistry,
Saliva,
Chemical extraction,
RNA,
Transcriptome,
Biomarkers
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