| Revue: | Revista de salud animal |
| Base de datos: | PERIÓDICA |
| Número de sistema: | 000399931 |
| ISSN: | 0253-570X |
| Autores: | Agüero, J.A1 Sánchez, O2 Barrera, Maritza1 Toledo, J.R2 |
| Instituciones: | 1Centro Nacional de Sanidad Agropecuaria, San José de las Lajas, La Habana. Cuba 2Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología, La Habana. Cuba |
| Año: | 2008 |
| Volumen: | 30 |
| Número: | 2 |
| Paginación: | 85-92 |
| País: | Cuba |
| Idioma: | Inglés |
| Tipo de documento: | Artículo |
| Enfoque: | Experimental, aplicado |
| Resumen en español | El virus de la fiebre porcina clásica (CSFV), perteneciente al género Pestivirus de la familia Flaviviridae, es un virus ARN positivo, altamente contagioso capaz de causar una enfermedad fatal caracterizada por fiebre, leucopenia y hemorragia, con considerables pérdidas económicas. Existe una gran demanda de una vacuna marcadora contra CSFV. C, Erns, E1 and E2 son las proteínas estructurales del virus. E2 es el mejor candidato para ser incorporado a una vacuna, mientras Erns resulta entonces un candidato ideal como antígeno en un ensayo de diagnóstico diferencial. En el vector pET28a se subclonó un fragmento sintético del gene que codifica para Erns (codificante para los aa 109-160). El clonaje se monitoreó por análisis de restricción. El gen se expresó como una proteína de fusión a histidina en la cepa BL21(DE3) de E. coli. El polipéptido recombinante formó agregados de aproximadamente 7.9; 15.8; 23.7; 31.6; 39.5; 47.5 y 55.3kDa. La proteína no fue reconocida por anticuerpos contra el virus por Western blot. Con el empleo de la cromatografía de afinidad a iones metálicos se obtuvo un producto recombinante con un 90% de pureza. Más adelante debe ser evaluado el empleo potencial de este antígeno para la detección de anticuerpos contra CSFV |
| Resumen en inglés | Classical swine fever virus (CSFV), belonging to the genus Pestivirus of the Flaviviridae family, is an enveloped positive stranded RNA virus highly contagious that can cause a fatal disease, characterized by fever, leukopenia and hemorrhage, with substantial economic losses. There is a great demand for a marker vaccine against CSFV. C, Erns, E1, and E2 are the structural proteins of the virus. E2 is the best candidate to be incorporated in vaccine, while Erns becomes an ideal candidate as an antigen in a differential diagnostic test. A synthetic fragment of the Erns gene (codifying for aa 109- 160) was subcloned into pET28a vector. The cloning was screened by restriction analysis. The gene was expressed as a his-tag fusion protein in BL21 (DE3) E. coli strain. The recombinant polypeptide formed aggregates of about 7.9; 15.8; 23.7; 31.6; 39.5; 47.5 and 55.3kDa. The protein was not recognized by Western blot using an antibody against the virus. Using an ion metal affinity chromatography procedure, a 90% pure recombinant product was obtained. The potential use of this antigen for detection of CSFV antibodies should be further evaluated |
| Disciplinas: | Medicina veterinaria y zootecnia, Biología |
| Palabras clave: | Porcinos, Genética, Virus, Biología molecular, Proteínas recombinantes, Peste porcina clásica |
| Keyword: | Veterinary medicine and animal husbandry, Biology, Poultry, Swine, Genetics, Virus, Molecular biology, Recombinant proteins, Classical swine fever |
| Texte intégral: | Texto completo (Ver PDF) |
