| Revue: | Revista da Sociedade Brasileira de Medicina Tropical |
| Base de datos: | PERIÓDICA |
| Número de sistema: | 000282244 |
| ISSN: | 0037-8682 |
| Autores: | Campos, Rozalia F1 Magalhaes, Juracy B Reis, Eliana A.G Reis, Mitermayer G Andrade, Sonia G |
| Instituciones: | 1Fundacao Instituto Oswaldo Cruz, Centro de Pesquisas Goncalo Moniz, Salvador, Bahia. Brasil |
| Año: | 2002 |
| Periodo: | Sep-Oct |
| Volumen: | 35 |
| Número: | 5 |
| Paginación: | 487-490 |
| País: | Brasil |
| Idioma: | Inglés |
| Tipo de documento: | Artículo |
| Enfoque: | Experimental |
| Resumen en inglés | To evaluate the sensitivity of polymerase chain reaction (PCR) to reveal known number of trypomastigote in the blood of mice, three separate experiments were done. First: To eight samples of 500mul of normal mice blood, one aliquot of 1, 2, 3, 4, 5, 10, and 50 trypomastigotes respectively, were added. Second and third: 10 aliquots with 1 and 10 with 2 trypomastigotes were added to samples of 500mul of normal mice blood. Positive control: 500mul of blood containing 100,000 trypomastigotes. For kDNA minicircles amplification by PCR the primers:S35 and S36 were used. PCR revealed products of 330 b.p in the positive controls. When only one sample with the aliquots of 1 or 2 trypomastigotes was examined, results were negative; results were positive with aliquots of 3 to 50 trypomastigotes. In the 2nd and 3rd experiments, 9/10 aliquots with one parasite and 9/10 with 2 trypomastigotes were positive revealing a high sensitivity of this reaction. In conclusion, the presence of one single parasite in 500mul of blood, is enough for a positive PCR. This method could be used as a complement to the various parasitological cure tests in treated mice, when low volumes of blood are individually examined |
| Resumen en portugués | A sensibilidade da reação em cadeia da polimerase (PCR) para revelar a presença de números conhecidos de tripomastigotas no sangue de camundongos, foi investigada em três experimentos separados. No primeiro, foram adicionados 1, 2, 3, 4, 5, 10, 20 e 50 tripomastigotas respectivamente, em oito amostras de 500mil de sangue de camundongo. No 2º e 3º experimentos: foram feitas 10 amostras contendo 1, e 10 amostras contendo 2 tripomastigotas/500mil de sangue. Controle positivo: 500mil de sangue contendo 100.000 trypomastigotas. Para amplificação dos minicirculos do kDNA pela PCR foram usados os iniciadores S35 e S36. A PCR revelou produtos de 330 p.b nos controles positivos e nas amostras contendo de 3 a 50 tripomastigotas. Quando apenas uma amostra contendo 1 ou 2 tripomastigotas foi examinada, os resultados foram negativos, porém no 2º e 3º experimentos 9/10 amostras contendo 1 e 2 tripomastigotas foram PCR positivas, revelando alta sensibilidade da reação. Em conclusão, a presença de um só parasito em 500mil de sangue é suficiente para uma PCR positiva e este método pode ser usado como complementação dos demais testes parasitológicos de cura, em camundongos tratados, quando pequenos volumes de sangue são individualmente examinados |
| Disciplinas: | Biología, Medicina veterinaria y zootecnia |
| Palabras clave: | Parasitología, Pequeñas especies, Trypanosoma cruzi, PCR, Roedores, Animales de laboratorio |
| Keyword: | Biology, Veterinary medicine and animal husbandry, Parasitology, Companion animals, Trypanosoma cruzi, PCR, Rodents, Laboratory animals |
| Texte intégral: | Texto completo (Ver HTML) |
