Cromatografia de afinidade com corante red a versus troca iônica-permeabilidade em gel: comparação da praticidade na purificação de enterotoxina estafilocócica A



Título del documento: Cromatografia de afinidade com corante red a versus troca iônica-permeabilidade em gel: comparação da praticidade na purificação de enterotoxina estafilocócica A
Revue: Ciencia e tecnologia de alimentos
Base de datos: PERIÓDICA
Número de sistema: 000294267
ISSN: 0101-2061
Autores: 1
2

Instituciones: 1Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos, Campinas, Sao Paulo. Brasil
2Universidade Estadual de Londrina, Londrina, Parana. Brasil
Año:
Periodo: May-Jul
Volumen: 18
Número: 2
Paginación: 165-168
País: Brasil
Idioma: Portugués
Tipo de documento: Artículo
Enfoque: Experimental, analítico
Resumen en inglés Culture supernatant of Staphylococcus aureus 722 in 3% triptone plus 1% yeast extract was used for EEA purification, proceeding comparison between dye ligand Red A affinity chromatography and classic chromatography. The capture of SEA with Amberlite CG-50 allowed rapid enterotoxin concentration from the culture supernatant. However, the ratio of 15 mg of the resin to a total of 150 mg of the toxin satured the resin, giving only 10 to 30% of SEA recuperation from the supernatant. The elution of concentrated material throught the Red A column resulted in a recovery of 60,87% of the toxin, and required 76 hours, indicating advantage on classic chromatography. Ion exchange column plus gel filtration recovered only 6,5 % of the SEA, and required 114 hours to conclude the procedure. The eletrophoresis of purified SEA indicated high grade of toxin obtained from Red A column, with 90 % of purity, compared to 60 % of classic column
Resumen en portugués O presente trabalho compara processos de purificação de enterotoxina estafilocócica A, utilizando cromatografia de afinidade com corante Red A em relação a troca iônica (SP - Sephadex C-25) - permeabilidade em gel (Sephadex G-75). Aplicou-se nas colunas o sobrenadante da cultura de Staphylococcus aureus 722 em caldo contendo 3% de triptona e suplementado com 1% de extrato de levedura, previamente concentradas com Amberlite CG-50. O processo capturou rapidamente a EEA, porém a proporção de 15 mg de resina para 150 mg de toxina causou saturação, recuperando apenas 10 a 30% de toxina do sobrenadante. A cromatografia de afinidade com Red A permitiu a recuperação de 60,87% de toxina aplicada em 76 horas, em relação a 114 horas requeridas para purificação utilizando coluna de troca iônica e permeabilidade em gel, com rendimento de 6,5%. O perfil eletroforético das amostras purificadas indicaram que, a toxina obtida da coluna Red A apresentou teor de pureza superior, na ordem de 90%, em relação a 60% atingida pelo método clássico
Disciplinas: Química
Palabras clave: Química analítica,
Química de alimentos,
Parasitología,
Staphylococcus aureus,
Enterotoxinas,
Purificación,
Cromatografía de afinidad
Keyword: Chemistry,
Analytical chemistry,
Food chemistry,
Parasitology,
Enterotoxins,
Staphylococcus aureus,
Purification,
Affinity chromatography
Texte intégral: Texto completo (Ver HTML)