| Revue: | Ciencia e investigación agraria |
| Base de datos: | PERIÓDICA |
| Número de sistema: | 000345525 |
| ISSN: | 0304-5609 |
| Autores: | Lopera Barrero, Nelson M1 Povh, Jayme Aparecido1 Ribeiro, Ricardo Pereira1 Gomes, Patricia C1 Jacometo, Carolina B1 Lopes, Tais da Silva1 |
| Instituciones: | 1Universidade Estadual de Maringa, Programa de Pos-graduacao em Zootecnia, Maringa, Parana. Brasil |
| Año: | 2008 |
| Periodo: | Ene-Abr |
| Volumen: | 35 |
| Número: | 1 |
| Paginación: | 77-86 |
| País: | Chile |
| Idioma: | Español |
| Tipo de documento: | Nota breve o noticia |
| Enfoque: | Experimental |
| Resumen en español | El uso de apropiados métodos de muestreo, tipo de tejido y la utilización de protocolos viables de extracción del ADN son aspectos críticos en estudios basados en PCR. Los métodos de extracción de ADN deben ser simples, reproducibles, económicos y no contaminantes. Este trabajo tuvo por objetivo comparar un protocolo modificado de extracción con sal común (NaCl) y un protocolo modificado de extracción con fenol-cloroformo para la obtención de ADN genómico en alta cantidad y calidad desde muestras de aleta y larva de pez (Brycon orbignyanus, Piaractus mesopotamicus, Oreochromis niloticus, Leporinus elongatus y Prochilodus lineatus). Las muestras aisladas de diferentes especies de peces usando la extracción con sal común permitieron obtener ADN de buena calidad (relación DNA/RNA 1.8-2.2) y fue usado con éxito en la amplificación de los marcadores moleculares RAPD y microsatélite. Esto demostró la misma efectividad de la extracción de ADN con sal común en comparación con el protocolo modificado de extracción con fenol-cloroformo. Este procedimiento de extracción de ADN constituye una alternativa y un reemplazo eficaz para los protocolos anteriores por mejorar los estudios moleculares en peces |
| Resumen en inglés | The use of appropriate sampling methods, the type of tissue or sample and the use of viable DNA extraction protocols are critical issues in studies based on PCR. In an attempt to identify a simple, reproducible, inexpensive and non-toxic method for obtaining high quality and quantity genomic DNA from fish fin and larvae samples, modified salt extraction protocol and modified phenol-chloroform extraction protocol were compared. The samples obtained from different fish species (Brycon orbignyanus, Piaractus mesopotamicus, Oreochromis niloticus, Leporinas elongatus and Prochilodus lineatus) using salt extraction showed good DNA quality and quantity (DNA/RNA relationship 1.8-2.2). These DNA samples were successfully used in the amplification of RAPD (Random Amplified Polymorphic DNA) and microsatellite molecular markers, demonstrating the same effectiveness of this protocol in comparison with modified phenol-chloroform extraction protocol. This DNA extraction procedure constitutes an alternative and efficient replacement for previous protocols for improving fish molecular studies |
| Disciplinas: | Biología, Química |
| Palabras clave: | Genética, Peces, Bioquímica, Extracción de ADN, Marcadores moleculares, Microsatélites, Reacción en cadena de la polimerasa (PCR), RAPD, Polimorfismo |
| Keyword: | Biology, Chemistry, Fish, Genetics, Biochemistry, DNA extraction, Molecular markers, Microsatellites, Polymerase chain reaction (PCR), RAPD, Polymorphism |
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