Genetic transformation of Drosophila willistoni using piggyBac transposon and GFP



Título del documento: Genetic transformation of Drosophila willistoni using piggyBac transposon and GFP
Revue: Brazilian archives of biology and technology
Base de datos: PERIÓDICA
Número de sistema: 000331750
ISSN: 1516-8913
Autores: 1
2
3
Instituciones: 1Universidade Federal de Santa Maria, Santa Maria, Rio Grande do Sul. Brasil
2Universidad de la República, Facultad de Ciencias, Montevideo. Uruguay
3Universidade Federal de Santa Maria, Departamento de Biologia, Santa Maria, Rio Grande do Sul. Brasil
Año:
Periodo: Ene
Volumen: 50
Número: 1
Paginación: 113-120
País: Brasil
Idioma: Inglés
Tipo de documento: Artículo
Enfoque: Experimental, analítico
Resumen en inglés Studies were carried out on the use of piggyBac transposable element as vector and the green fluorescent protein (EGFP) from the jellyfish, Aquorea victoria, as a genetic marker for the transformation of Drosophila willistoni. Preblastoderm embryos of D. willistoni white mutant were microinjected with a plasmid containing the EGFP marker and the piggyBac ITRs, together with a helper plasmid containing the piggyBac transposase placed under the control of the D. melanogaster hsp70 promoter. G0 adults transformants were recovered at a frequency of approximately 67%. Expression of EGFP in larvae, pupae and adults was observed up to the third generation, suggesting that this transposon was not stable in D. willistoni. Transformed individuals displayed high levels of EGFP expression during larvae and adult stages in the eye, abdomen, thorax and legs, suggesting a wide expression pattern in this species than reported to other species of Drosophilidae
Resumen en portugués Descrevemos neste trabalho a transformação genética de Drosophila willistoni empregando o elemento transponível piggyBac como vetor e o gene EGFP (green fluorescent protein ) retirado da água-viva Aquorea victoria, como marcador de transformação. Embriões de D. willistoni em estágio pré-blastoderme, mutantes para o gene white, foram microinjetados com plasmídio contendo o marcador EGFP e as regiões ITRs do transposon piggyBac concomitantemente com um plasmídio auxiliar possuindo o gene da transposase de piggyBac sobre o controle do promotor do gene hsp70 de Drosophila melanogaster. Adultos transformantes Go foram gerados em uma taxa de 67%. A expressão de GFP em larvas, pupas e adultos foi observada somente até a terceira geração, sugerindo que este transposon não é estável em D. willistoni. Os indivíduos transformados exigem um alto nível de expressão de EGFP durante os estágios de larva e, também em adultos o gene marcador é expresso nos olhos, abdome, tórax e patas, mostrando um padrão de expressão mais amplo nesta espécie do que o registrado para outros drosofilídeos
Disciplinas: Biología
Palabras clave: Evolución y filogenia,
Genética,
Insectos,
Drosophila willistoni,
Transformación genética,
Transgénesis,
Marcadores moleculares,
Proteínas
Keyword: Biology,
Evolution and phylogeny,
Genetics,
Insects,
Drosophila willistoni,
Genetic transformation,
Transgenesis,
Molecular markers,
Proteins
Texte intégral: Texto completo (Ver HTML)