Optimización de un sistema de traducción in vitro derivado de placenta humana para la evaluación de antibióticos
Document title: Optimización de un sistema de traducción in vitro derivado de placenta humana para la evaluación de antibióticos
Journal: Salus
Database: PERIÓDICA
System number: 000272395
ISSN: 1316-7138
Authors: 1
Institutions: 1Universidad de Carabobo, Facultad de Ciencias de la Salud, Maracay, Aragua. Venezuela
Year:
Season: Ago
Volumen: 11
Number: 2
Pages: 48-53
Country: Venezuela
Language: Español
Document type: Artículo
Approach: Experimental, analítico
Spanish abstract Un sistema de traducción in vitro derivado de placenta humana es una herramienta útil para estimar el efecto que tendrían antibióticos nuevos sobre la síntesis de proteínas en células humanas. Una modalidad simple de ensayo in vitro es la síntesis de polifenilalanina o poli(Phe), dependiente del ARN sintético poli(U). Para optimizar este ensayo, se purifi có ARNtPhe homólogo, partiendo de ARNt total de placenta, mediante una combinación de cromatografía hidrofóbica y de alta presión en fase reversa (RP-HPLC). Al incorporar el ARNtPhe purifi cado a los ensayos se duplicó la efi ciencia de síntesis de poli(Phe) con respecto a la obtenida con un ARNt total heterólogo de levadura. El sistema de ensayo optimizado fue usado para determinar el efecto de antibióticos sobre la elongación de polipéptidos por ribosomas humanos. La actividad ribosomal fue inhibida efi cientemente por antibióticos que actúan sobre el ribosoma eucariota (cicloheximida y emetina, IC50 ≅ 40-60 μmol/L y 10-30 μmol/L, respectivamente). Por el contrario, antibióticos que actúan sobre el ribosoma bacteriano (cloranfenicol, azitromicina, y clindamicina) no mostraron efecto inhibitorio aún a concentraciones altas (hasta 1 mmol/L). Estos resultados demuestran la sensibilidad diferencial esperada del sistema in vitro y su potencialidad para ser utilizado en una evaluación temprana y rápida del efecto de antibióticos de nueva generación sobre la síntesis de proteínas con ribosomas humanos. Por lo tanto, el sistema de ensayo in vitro permitiría seleccionar aquellos compuestos con mejores posibilidades para las pruebas posteriores necesarias para establecer su uso terapéutico en humanos
Disciplines: Medicina
Keyword: Farmacología,
Genética,
Ribosomas,
Placenta,
Antibióticos,
Ensayos,
Traducción,
In vitro
Keyword: Medicine,
Pharmacology,
Ribosomes,
Placenta,
Antibiotics,
Assays,
In vitro culture,
Translation,
Genetics
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