| Journal: | Salus |
| Database: | PERIÓDICA |
| System number: | 000332589 |
| ISSN: | 1316-7138 |
| Authors: | De Lima, Ana Rita1 Arévalo, Patricia1 Bastidas, Valentina1 Bolívar, María Luisa1 Navarro, María Consuelo1 Contreras, Víctor1 |
| Institutions: | 1Universidad de Carabobo, Centro de Biología Molecular de Parásitos, Valencia, Carabobo. Venezuela |
| Year: | 2007 |
| Volumen: | 11 |
| Pages: | 20-26 |
| Country: | Venezuela |
| Language: | Español |
| Document type: | Artículo |
| Approach: | Analítico, descriptivo |
| Spanish abstract | Para el diagnóstico serológico de la enfermedad de Chagas se emplea principalmente extractos proteicos totales de epimastigotas de Trypanosoma cruzi, cuya obtención masiva implica el cultivo en medio axénico. Previamente demostramos cambios en los perfiles peptídico y glicopeptídico en un mismo aislado del parásito cuando es mantenido mediante cultivo prolongado en medio axénico LITB (condición cultivo) o mediante pases alternos entre triatomino y vertebrado (condición triatomino). En este trabajo se determinó la variación en la oferta antigénica de T. cruzi para el diagnóstico de la enfermedad de Chagas cuando el parásito es mantenido bajo diferentes esquemas en el laboratorio. Para ello se obtuvieron fracciones proteicas y glicoproteicas de epimastigotas de T. cruzi (cepa EP) mantenidos bajo las condiciones triatomino y cultivo, las cuales se caracterizaron mediante electroforesis (SDS-PAGE) y coloraciones específicas. El análisis antigénico se realizó mediante inmunobloting empleando sueros de pacientes con enfermedad de Chagas, leishmaniasis, lupus eritematoso sistémico ó LES, sífilis, toxoplasmosis e individuos aparentemente sanos (IAS). Nuestros resultados mostraron cambios en los perfiles peptídico y glicopeptídico de parásitos mantenidos en diferentes condiciones de mantenimiento. Los sueros chagásicos mostraron reconocimiento de mayor número de antígenos procedentes de la condición cultivo, sin embargo éstos presentaron mayor índice de reacciones cruzadas con leishmaniasis y LES. El patrón de bandas reconocidas por los diferentes sueros chagásicos mostró una mayor heterogeneidad en antígenos de la condición triatomino, mientras que los procedentes de la condición cultivo mostraron una tendencia hacia un perfil antigénico común. No se observó reconocimiento de antígenos de las condiciones triatomino y cultivo en IAS, pacientes con sífilis y toxoplasmosis. Estos resultados indican la necesidad de estandarizar |
| English abstract | In the serological diagnosis of Chagas disease total protein extract is mainly used from Trypanosoma cruzi's epimastigotes, massive production of which involves culturing the parasite in an axenic medium. Previously, we showed changes in protein and glycoprotein profiles in the same parasite isolate when it is maintained in axenic medium LITB (culture condition) or by alternate triatomine and vertebrate passages (triatomine condition). In this work we determined the variation in the T. cruzi antigen composition for Chagas disease diagnosis when the parasite is maintained in the laboratory under different schemata. By electrophoresis (SDSPAGE), the peptide and glycopectide profiles of T. cruzi's epimastigotes (EP strain) maintained under triatomine and culture conditions were characterized. Antigenic analysis with Western blot used serum from patients with Chagas disease, leishmaniasis, systemic lupus erythematosus (SLE), syphilis, toxoplasmosis and seemingly-healthy individuals. Results showed changes in protein and glycoprotein profiles from parasites maintained under different conditions. Chagasic sera recognized a greater number of antigens from culture condition; nevertheless, these antigens presented more cross reactions with leishmaniasis and SLE. The band profiles recognized by chagasic sera showed a greater heterogeneity in antigens from triatomine condition, while the antigens from culture condition showed a tendency toward a common antigen profile. Sera from patients with syphilis, toxoplasmosis and healthy individuals did not recognize antigens in any of the two maintenance conditions. These results stress the need to standardize variables for obtaining T. cruzi antigens for diagnostic purposes in order to ensure sensitivity and accuracy of results |
| Disciplines: | Medicina |
| Keyword: | Diagnóstico, Parasitología, Enfermedad de Chagas, Diagnóstico serológico, Inmunoprecipitación, Antígenos, Trypanosoma cruzi |
| Keyword: | Medicine, Diagnosis, Parasitology, Chagas disease, Serological diagnosis, Immunoblotting, Antigens, Trypanosoma cruzi |
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