| Journal: | Revista mexicana de patología clínica |
| Database: | PERIÓDICA |
| System number: | 000268079 |
| ISSN: | 0185-6014 |
| Authors: | Charles Niño, Claudia1 Garza Rodríguez, María de Lourdes Ramos Jiménez, Javier Rivas Estilla, Ana María |
| Institutions: | 1Universidad Autónoma de Nuevo León, Facultad de Medicina, Monterrey, Nuevo León. México |
| Year: | 2006 |
| Season: | Jul-Sep |
| Volumen: | 53 |
| Number: | 3 |
| Pages: | 146-150 |
| Country: | México |
| Language: | Español |
| Document type: | Artículo |
| Approach: | Descriptivo |
| Spanish abstract | El síndrome respiratorio agudo severo (SARS) es una enfermedad infecciosa emergente causada por el SARS-Coronavirus (SARS-CoV). Una de las técnicas más específicas y sensibles para el diagnóstico virológico es la reacción en cadena de la polimerasa (PCR). Se ha reportado que mediante PCR se puede detectar el virus directamente de muestras de pacientes durante la primera semana de hospitalización. En este trabajo nos propusimos estandarizar e implementar una prueba de diagnóstico molecular para el SARS-CoV en nuestra región. La síntesis de ADNc se realizó a partir de ARN del SARS-CoV donado por el Instituto de Medicina Tropical de la Universidad de Frankfurt, Alemania, y simultáneamente se amplificó una secuencia del virus mediante PCR. Después se realizó una segunda amplificación para aumentar la sensibilidad y especificidad. Los productos amplificados fueron detectados mediante electroforesis y tinción con bromuro de etidio. Variando las condiciones de amplificación (concentración de iniciadores, ciclos de amplificación y temperaturas de alineamiento), se lograron amplificar de manera reproducible dos fragmentos de ADN del tamaño esperado (195 y 110 pb). Con estos resultados podemos mencionar que la aplicación de pruebas moleculares permite una identificación rápida, sensible y específica del SARS-CoV en pacientes sospechosos en nuestra región |
| English abstract | The etiological agent of SARS, an emerging infectious disease, is the coronavirus named SARS-CoV. Rapid diagnostic test are very important for case recognition and management of infected people. Because the Polymerase Chain Reaction (PCR) has a high sensitivity and specificity it has been used as a viral diagnosis tool. Several reports demonstrate SARS-CoV detection by PCR from patients during the firs week of hospitalization. The major aim of this work was to standardize and set up in our region the molecular diagnosis of this virus. We performed a cDNA synthesis from SARS CoV-RNA (kindly donated by Bernhard Notch Tropical Institute Hamburg, Germany) and simultaneously we amplified by PCR a fragment of 195 bp in a single tube. In order to increase sensibility and specificity we performed a Nested PCR to amplify a second DNA fragment. Both PCR products were detected by electrophoresis and ethidium bromide staining. Variation in amplification parameters such as, primers concentration, amplification cycles and annealing temperature, we amplified two reproducible fragments of 195 and 110 bp. Based in our results, now we can apply molecular assays, as PCR, in order to perform a highly sensitive and specific molecular diagnosis of SARS-CoV in suspected patients in our region |
| Disciplines: | Medicina, Biología |
| Keyword: | Diagnóstico, Neumología, Virus, Síndrome respiratorio agudo severo, Coronavirus, PCR, Virología, Biología molecular |
| Keyword: | Medicine, Biology, Diagnosis, Pneumology, Virus, Severe acute respiratory syndrome, Coronavirus, PCR, Virology, Molecular biology |
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