Técnicas para el aislamiento, identificación y caracterización molecular de cepas de Ralstonia solanacearum relacionadas a Moko del plátano



Document title: Técnicas para el aislamiento, identificación y caracterización molecular de cepas de Ralstonia solanacearum relacionadas a Moko del plátano
Journal: Revista mexicana de fitopatología
Database: PERIÓDICA
System number: 000413994
ISSN: 0185-3309
Authors: 1
1
1
2
Institutions: 1Centro de Investigación Científica de Yucatán A.C., Unidad de Biotecnología, Mérida, Yucatán. México
2Centro de Investigación y Asistencia en Tecnología y Diseño del Estado de Jalisco A.C, Guadalajara, Jalisco. México
Year:
Season: Sep
Volumen: 35
Number: 3
Pages: 509-533
Country: México
Language: Español, inglés
Document type: Artículo
Approach: Experimental, aplicado
Spanish abstract Ralstonia solanacearum es uno de los fitopatógenos más destructivos en la agricultura; en el cultivo de plátano la raza 2 causa la enfermedad denominada Moko del plátano, la cual en México está restringida a algunas áreas y provoca pérdidas cuando ocurren brotes epidémicos. La raza 2 comprende subgrupos (secuevares), los cuales usualmente son identificados mediante PCR de tipo Multiplex. El aislamiento de R. solanacearum es usualmente difícil, aún sobre medios semiselectivos, debido a su crecimiento lento y a la frecuente contaminación con bacterias Pseudomonas, Klebsiella y Erwinia, que presentan fenotipos similares. En este trabajo se presenta una estrategia que facilita el aislamiento, identificación y clasificación de R. solanacearum raza 2. El protocolo comprende inmunodiagnóstico del material vegetal sospechoso, confirmación mediante PCR, aislamiento sobre medios semiselectivos SMSA y B-King, y genotipificación de los secuevares mediante reacciones de PCR sencillas, específicas. En el presente trabajo se aislaron 25 cepas de muestras obtenidas del estado de Tabasco, las cuales genotipificaron en el secuevar 6. Su previa genotipificación mediante Multiplex fue confusa, lo que evidencia que ese ensayo puede llevar a conclusiones erróneas. Por lo tanto no es válido proponer divergencia genética y emergencia de nuevas cepas con base en su resultado, como se ha hecho en algunos reportes recientes
English abstract Ralstonia solanacearum is one of the most destructive phytopathogens in the agriculture. In banana cultivation, the race 2 causes Moko disease, which is present in some areas in Mexico, and when epidemic outbreaks burst there are losses. Race 2 comprises subgroups (sequevars) which are usually identified by Multiplex PCR reactions. Isolation of R. solanacearum is usually hard, even on semiselective media, because it grows slowly and it is frequently contaminated with Pseudomonas, Klebsiella and Erwinia bacteria, which show similar phenotypes. This work shows a strategy that make easy the isolation, identification and classification of R. solanacearum race 2. The protocol comprises immunodiagnosis of plant suspicious samples, confirmation of diagnosis by PCR, isolation on semiselective media SMSA and B-King, and genotyping of sequevars by single, specific PCR reactions. In the present work 25 strains were isolated from Tabasco, and they genotyped in sequevar 6. Their previous genotyping by Multiplex yielded confuse results, which make evident that Multiplex can result in incorrect conclusions. We discourage to propose genetic divergence and emergency of new strains based on Multiplex results, as done in some recent reports
Disciplines: Agrociencias,
Biología
Keyword: Fitopatología,
Frutales,
Bacterias,
Ralstonia solanacearum,
Genotipos,
Caracterización molecular,
Plátano
Keyword: Agricultural sciences,
Biology,
Fruit trees,
Phytopathology,
Bacteria,
Ralstonia solanacearum,
Genotypes,
Molecular characterization,
Banana
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