Detección y tipificación del virus sincitial respiratorio mediante la técnica RT- PCR anidada en pacientes con infección respiratoria aguda



Document title: Detección y tipificación del virus sincitial respiratorio mediante la técnica RT- PCR anidada en pacientes con infección respiratoria aguda
Journal: Revista del Instituto Nacional de Enfermedades Respiratorias
Database: PERIÓDICA
System number: 000317194
ISSN: 0187-7585
Authors: 1

2

Institutions: 1Universidad de los Andes, Laboratorio de Diagnóstico Molecular y Bioinformática, Bogotá. Colombia
2Secretaría Distrital de Salud, Laboratorio de Salud Pública, Bogotá. Colombia
Year:
Season: Abr-Jun
Volumen: 21
Number: 2
Pages: 92-98
Country: México
Language: Español
Document type: Artículo
Approach: Aplicado
Spanish abstract Antecedentes: El virus sincitial respiratorio (VSR) es uno de los principales agentes etiológicos de la infección respiratoria aguda (IRA), considerada como una de las causas más importantes de morbimortalidad infantil en el mundo. El diagnóstico de la entidad y, específicamente, la detección y caracterización de ciertos agentes usando los métodos convencionales presenta algunas falencias que pruebas moleculares como el PCR de transcripción reversa (RT-PCR) intentan resolver. Objetivo: Desarrollo de un protocolo de RT-PCR anidada para la detección y tipificación del VSR en muestras respiratorias. Métodos: Se incluyeron hisopados y aspirados nasofaríngeos provenientes de enfermos con clínica compatible con IRA, reportados como positivos o negativos para el VSR por inmunofluorescencia. Se aplicó la técnica molecular RT-PCR seguida de un PCR anidada, para la detección y tipificación del VSR usando como blanco de amplificación el gen de la nucleocápside, que diferencia los tipos A y B gracias al tamaño de sus amplicones. Resultados: Se procesaron en total 30 muestras, de las cuales 2 resultaron positivas para el VSR tipo A, 16 positivas para el VSR tipo B, y 7 mostraron una infección mixta por los tipos A y B; 5 fueron negativas para VSR. Conclusión: Los resultados sugieren que el protocolo de RT-PCR aquí presentado ofrece una alternativa rápidad y eficaz para la detección y tipificación del VSR a partir de muestras respiratorias
English abstract Respiratory Syncytial Virus (RSV) is one of the main causes of acute lower respiratory tract infections (ALRTI), and one of the most important causes of morbidity and mortality in infants worldwide. Diagnosis of the entity and specifically, detection and characterization of certain ethiological agents by conventional methods carries difficulties that molecular techniques such as reverse transcription PCR (RT-PCR) pretend to overcome. Objective: To develop a nested RT-PCR protocol for the detection and typing of RSV in respiratory simples. Methods: Nasopharyngeal swabs and aspirates from patients with symptoms compatible of ALRTI, that tested positive or negative for RSV by immunofluorescence assay, were used in this study. The molecular technique applied was a RT-PCR followed by a nested PCR using primers for the nucleocapsid gen, that discriminate RSV type A from B by the differential size of the amplicons. Results: A total of 30 samples were processed, resulting in 2 positives for RSV type A, 16 for RSV type B, and 7 positive to both types; 5 were negative for RSV. Conclusion:Our results suggest thar this RT-PCR protocol represents a quick and effective alternative for the detection an typing of RSV from respiratory samples
Disciplines: Medicina
Keyword: Diagnóstico,
Microbiología,
Salud pública,
Virus respiratorio sincitial,
Infecciones,
PCR,
Técnicas de diagnóstico,
Diagnóstico molecular,
Tipificación
Keyword: Medicine,
Diagnosis,
Microbiology,
Public health,
Respiratory syncytial virus,
Infections,
Diagnostic techniques,
PCR,
Molecular diagnosis,
Typification
Full text: Texto completo (Ver HTML)