| Journal: | Revista de investigaciones veterinarias del Perú |
| Database: | PERIÓDICA |
| System number: | 000388092 |
| ISSN: | 1609-9117 |
| Authors: | Tambillo, Luis1 Manchego, Alberto1 Chiok, Kim-Lam1 Sandoval, Nieves1 More, Juan1 Rivera, Hermelinda1 |
| Institutions: | 1Universidad Nacional Mayor de San Marcos, Facultad de Medicina Veterinaria, Lima. Perú |
| Year: | 2013 |
| Volumen: | 24 |
| Number: | 4 |
| Pages: | 510-523 |
| Country: | Perú |
| Language: | Español |
| Document type: | Artículo |
| Approach: | Experimental |
| Spanish abstract | El objetivo del presente estudio fue evaluar la expresión de citoquinas proinflamatorias de leucocitos circulantes de alpaca al enfrentarlos a extracto total de Clostidium perfringens (componentes estructurales y toxinas). Se colectó sangre entera de la vena yugular de 5 alpacas hembras y 5 alpacas machos adultos. Los leucocitos fueron separados utilizando cloruro de amonio para lisar los eritrocitos, seguido de centrifugación y luego cultivados a una concentración de 500 000 leucocitos/ml de medio MEM (Medio Mínimo Esencial) en placas de cultivo de 12 pocillos. Simultáneamente, fueron enfrentados a extracto total de C. perfringens cultivados en caldo tioglicolato a concentraciones de 400, 80, 16, 0.8 y 0.2 μg/ml, para luego cuantificar, mediante la RTPCR, la expresión de las citoquinas TNF, IL-1, IL-1ß e IL-6 a 1, 12 y 24 h de exposición. Los resultados demostraron que dosis bajas de extractos clostridiales (0.2 a 0.8 μg/ml) son capaces de inducir expresiones de TNF, IL-1, e IL-1ß a 1, 12 y 24 h de incubación, a diferencia de dosis altas donde no sobrepasan la expresión de las citoquinas en leucocitos no estimulados (control). No se evidencia producción considerable de IL-6 hasta las 24 h post exposición a extracto completo de C. perfringens. Los resultados indican que el C. perfringens y sus toxinas a dosis bajas inducen la activación de los leucocitos circulantes de alpacas produciendo la secreción de citoquinas proinflamatorias |
| English abstract | The aim of this study was to evaluate the expression of proinflammatory cytokines of alpaca circulating leukocytes when confronting total extract of Clostridum perfringens (structural components and toxins). Whole blood was collected from the jugular vein of 5 female and 5 male adult alpacas. The leukocytes were separated using ammonium chloride to lyse erythrocytes followed by centrifugation and then cultured at a concentration of 500 000 cells/ml of MEM (Minimal Essential Medium) in culture plates of 12 wells. Simultaneously were challenged with total extract of C. perfringens grown in thioglycolate broth at concentrations of 400, 80, 16, 0.8 and 0.2 μg/ml and then quantifying by RT-PCR the expression of cytokines TNF, IL-1, IL-6 and IL-1ß at 1, 12 and 24 h of exposure. The results showed that low doses of clostridial extracts (0.2 to 0.8 mg/ml) are capable of inducing expression of TNF, IL-1 and IL-1ß at 1, 12 and 24 h of incubation, whereas higher doses do not exceed the expression of cytokines in unstimulated (control) leukocytes. There was no significant production of IL-6 up to 24 h after exposure to whole extract of C. perfringens. These results indicate that C. perfringens and its toxins at low doses induce activation of circulatory leukocyte in alpacas producing proinflammatory cytokine secretion |
| Disciplines: | Medicina veterinaria y zootecnia |
| Keyword: | Medicina veterinaria, Otras especies de interés zootécnico, Alpacas, Enterotoxemia, Citocinas, Clostridium perfringens, PCR, Fisiología animal |
| Keyword: | Veterinary medicine and animal husbandry, Species of commercial interest, Veterinary medicine, Alpacas, Enterotoxaemia, Cytokines, Clostridium perfringens, PCR, Animal physiology |
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