Isolamento e eficiência de plaqueamento de protoplastos de citros



Document title: Isolamento e eficiência de plaqueamento de protoplastos de citros
Journal: Revista brasileira de fruticultura
Database: PERIÓDICA
System number: 000303764
ISSN: 0100-2945
Authors: 1
2
3
Institutions: 1Universidade Federal da Bahia, Escola de Agronomia, Salvador, Bahia. Brasil
2Universidade de Sao Paulo, Escola Superior de Agricultura "Luiz de Queiroz", Piracicaba, Sao Paulo. Brasil
3Universidade de Sao Paulo, Centro de Energia Nuclear na Agricultura, Piracicaba, Sao Paulo. Brasil
Year:
Season: Ago
Volumen: 24
Number: 2
Pages: 472-476
Country: Brasil
Language: Portugués
Document type: Nota breve o noticia
Approach: Experimental
English abstract Recent biotechnological tools for citrus improvement include somatic hybridization by protoplast fusion. The optimization of protoplast isolation, platting and culture, essential for hybrid regeneration, was evaluated in 11 citrus varieties. The enzymatic solutions tested were: 1. cellulase Onozuka RS, 1%; macerozyme R-10, 1%, pectoliase Y-23, 0.2%; 2. celullase Onozuka R-10, 0.2 %; macerozyme R-10, 0.3%; driselase, 0.1%; 3. celulase Onozuka R-10, 1%; macerase R-10, 0.2%; driselase, 0.1%. Protoplasts were cultured in EME 0.7 M at densities of 2 x 10(4); 5 x 10(4); 10(5); 2 x 10(5) e 3 x 10(5) protoplasts.mL-1, in darkness, at 25 ± 1°C. The enzymatic solution 1 resulted in better protoplast isolation for most of the varieties studied, except for Rangpur lime, which presented higher isolation efficiency on enzymatic solution 3, and for 'Valencia' and 'Succari' sweet oranges, with better results were obtained on enzymatic solution 3. Final platting efficiency, evaluated 90 days after culture, was higher at the densities of 10(5) e 2 x 10(5) protoplasts.mL-1, for all varieties. Somatic embryogenesis was observed for all varieties, except for 'Murcott' tangor
Portuguese abstract As recentes ferramentas biotecnológicas para o melhoramento in vitro de citros incluem a hibridação somática por fusão de protoplastos. A otimização dos protocolos de isolamento, plaqueamento e cultura de protoplastos, fundamental para maior eficiência na produção de híbridos somáticos, foi avaliada em 11 variedades cítricas. As soluções enzimáticas testadas foram: 1. celulase Onozuka RS, 1%; macerase R-10, 1%, pectoliase Y-23, 0,2%; 2. celulase Onozuka R-10, 0,2 %; macerase R-10, 0,3%; driselase, 0,1%; 3. celulase Onozuka R-10, 1%; macerase R-10, 0,2%; driselase, 0,1%. O plaqueamento dos protoplastos foi realizado em meio de cultura EME 0,7 M, nas densidades de 2 x 10(4); 5 x 10(4); 10(5); 2 x 10(5) e 3 x 10(5) protoplastos.mL-1, no escuro, a 25 ± 1°C. A solução enzimática 1 possibilitou melhor rendimento no isolamento de protoplastos para a maioria das variedades, exceto para o limão-'Cravo', onde o melhor rendimento foi obtido na solução enzimática 3, e para as laranjas-doces 'Valência' e 'Succari', que apresentaram maiores rendimentos na solução enzimática 2. A eficiência final de plaqueamento, avaliada aos 90 dias de cultivo, foi superior nas densidades de 10(5) e 2 x 10(5) protoplastos.mL-1, para todas as variedades. O desenvolvimento de embriões somáticos foi observado em todas as variedades, exceto para tangor 'Murcote'
Disciplines: Agrociencias,
Biología
Keyword: Frutales,
Biología molecular,
Citrus,
Hibridación,
Mejoramiento genético,
Protoplastos,
Embriogénesis somática
Keyword: Agricultural sciences,
Biology,
Fruit trees,
Molecular biology,
Citrus,
Hybridization,
Genetic improvement,
Protoplasts,
Somatic embryogenesis
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