dGMP-BPDE DNA adduct investigation in environmentally exposed rural workers by capillary electrophoresis with laser-induced fluorescence detection



Document title: dGMP-BPDE DNA adduct investigation in environmentally exposed rural workers by capillary electrophoresis with laser-induced fluorescence detection
Journal: Journal of the Brazilian Chemical Society
Database: PERIÓDICA
System number: 000311714
ISSN: 0103-5053
Authors: 1


2
Institutions: 1Universidade de Sao Paulo, Instituto de Quimica de Sao Carlos, Sao Carlos, Sao Paulo. Brasil
2Universidade Federal de Goias, Instituto de Quimica, Goiania, Goias. Brasil
Year:
Season: Abr
Volumen: 16
Number: 2
Pages: 220-226
Country: Brasil
Language: Inglés
Document type: Artículo
Approach: Experimental, aplicado
English abstract An alternative method to 32P-postlabeling has been proposed for sensitive detection and quantitation of deoxyguanosine monophosphate - benzo[a]pyrenediol epoxide (dGMP-BPDE), a biomarker for human exposure to carcinogenic polycyclic aromatic hydrocarbons (PAH), using capillary electrophoresis with laser-induced fluorescence detection (CE-LIF). A modified CE-LIF instrument was adjusted to operate with a He/Cd UV laser (325 nm) for native fluorescence detection from BPDE adducts. The method was linear over three decades in concentration, with the detection limit of 2.5 × 10-9 mol L-1 at the signal-to-noise ratio of three after consecutive dilution of the dGMP-BPDE standard. At this level, recovery of 1 adduct per 10(7) normal nucleotides was possible. The RSD values for inter- and intra-day determination were better than 7% and recovery studies at three different levels yielded values around 50%. This method has been validated and for the first time applied to determination of dGMP-BPDE in blood samples from Brazilian rural workers, which were exposed to PAH in sugar-cane plantation harvesting and charcoal-production ovens
Portuguese abstract Um método alternativo à pos-marcação com 32P radioativo foi proposta para a determinação do aduto de desoxiguanosina monofosfato com epóxido de benzo[a]pirenodiol (dGMP-BPDE), um biomarcador para exposição humana à hidrocarbonetos policíclicos aromáticos (PAH) carcinogênicos, usando eletroforese capilar com fluorescência induzida a laser (CE-LIF). O instrumento CE-LIF modificado foi ajustado para operar com um laser UV de He/Cd (325 nm) para detecção da fluorescência nativa dos adutos de BPDE. O método foi linear por mais de três ordens de grandeza e apresentou limites de detecção de 2,5 × 10-9 mol L-1 com relação sinal/ruído igual a 3 após diluições sucessivas do padrão de dGMP-BPDE. Neste nível de concentração, a recuperação foi de 1 aduto para cada 10(7) bases não modificadas. Os valores de CV% para ensaios inter- e intra-dias foi melhor que 7% e os estudos de recuperação em três níveis diferentes renderam valores em torno de 50%. Este método foi validado e aplicado pela primeira vez a determinação de dGMP-BPDE em amostras de sangue provenientes de trabalhadores rurais Brasileiros, os quais foram expostos a PAH na colheita de cana-de-açucar e fornos de produção de carvão vegetal
Disciplines: Medicina,
Química
Keyword: Toxicología,
Química analítica,
Biomarcadores,
Carcinogenicidad,
Hidrocarburos aromáticos policíclicos,
Exposición ambiental,
Electroforesis capilar
Keyword: Medicine,
Chemistry,
Toxicology,
Analytical chemistry,
Biomarkers,
Carcinogenicity,
Polycyclic aromatic hydrocarbons,
Environmental exposure,
Capillary electrophoresis
Full text: Texto completo (Ver HTML)