Journal: | Journal of the Brazilian Chemical Society |
Database: | PERIÓDICA |
System number: | 000311714 |
ISSN: | 0103-5053 |
Authors: | Carrilho, Emanuel1 Formenton-Catai, Ana Paula Lancas, Fernando M Pereira, Delma M2 |
Institutions: | 1Universidade de Sao Paulo, Instituto de Quimica de Sao Carlos, Sao Carlos, Sao Paulo. Brasil 2Universidade Federal de Goias, Instituto de Quimica, Goiania, Goias. Brasil |
Year: | 2005 |
Season: | Abr |
Volumen: | 16 |
Number: | 2 |
Pages: | 220-226 |
Country: | Brasil |
Language: | Inglés |
Document type: | Artículo |
Approach: | Experimental, aplicado |
English abstract | An alternative method to 32P-postlabeling has been proposed for sensitive detection and quantitation of deoxyguanosine monophosphate - benzo[a]pyrenediol epoxide (dGMP-BPDE), a biomarker for human exposure to carcinogenic polycyclic aromatic hydrocarbons (PAH), using capillary electrophoresis with laser-induced fluorescence detection (CE-LIF). A modified CE-LIF instrument was adjusted to operate with a He/Cd UV laser (325 nm) for native fluorescence detection from BPDE adducts. The method was linear over three decades in concentration, with the detection limit of 2.5 × 10-9 mol L-1 at the signal-to-noise ratio of three after consecutive dilution of the dGMP-BPDE standard. At this level, recovery of 1 adduct per 10(7) normal nucleotides was possible. The RSD values for inter- and intra-day determination were better than 7% and recovery studies at three different levels yielded values around 50%. This method has been validated and for the first time applied to determination of dGMP-BPDE in blood samples from Brazilian rural workers, which were exposed to PAH in sugar-cane plantation harvesting and charcoal-production ovens |
Portuguese abstract | Um método alternativo à pos-marcação com 32P radioativo foi proposta para a determinação do aduto de desoxiguanosina monofosfato com epóxido de benzo[a]pirenodiol (dGMP-BPDE), um biomarcador para exposição humana à hidrocarbonetos policíclicos aromáticos (PAH) carcinogênicos, usando eletroforese capilar com fluorescência induzida a laser (CE-LIF). O instrumento CE-LIF modificado foi ajustado para operar com um laser UV de He/Cd (325 nm) para detecção da fluorescência nativa dos adutos de BPDE. O método foi linear por mais de três ordens de grandeza e apresentou limites de detecção de 2,5 × 10-9 mol L-1 com relação sinal/ruído igual a 3 após diluições sucessivas do padrão de dGMP-BPDE. Neste nível de concentração, a recuperação foi de 1 aduto para cada 10(7) bases não modificadas. Os valores de CV% para ensaios inter- e intra-dias foi melhor que 7% e os estudos de recuperação em três níveis diferentes renderam valores em torno de 50%. Este método foi validado e aplicado pela primeira vez a determinação de dGMP-BPDE em amostras de sangue provenientes de trabalhadores rurais Brasileiros, os quais foram expostos a PAH na colheita de cana-de-açucar e fornos de produção de carvão vegetal |
Disciplines: | Medicina, Química |
Keyword: | Toxicología, Química analítica, Biomarcadores, Carcinogenicidad, Hidrocarburos aromáticos policíclicos, Exposición ambiental, Electroforesis capilar |
Keyword: | Medicine, Chemistry, Toxicology, Analytical chemistry, Biomarkers, Carcinogenicity, Polycyclic aromatic hydrocarbons, Environmental exposure, Capillary electrophoresis |
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