Detecção de um begomovírus em amostras foliares de tomateiro com sondas não-radioativas



Document title: Detecção de um begomovírus em amostras foliares de tomateiro com sondas não-radioativas
Journal: Ciencia rural
Database: PERIÓDICA
System number: 000278341
ISSN: 0103-8478
Authors: 1
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Institutions: 1Universidade Federal de Pelotas, Pelotas, Rio Grande do Sul. Brasil
2Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuaria, Centro Nacional de Pesquisa de Hortalicas, Brasilia, Distrito Federal. Brasil
3Universidade Catolica de Brasilia, Brasilia, Distrito Federal. Brasil
4Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuaria, Centro Nacional de Pesquisa de Recursos Geneticos e Biotecnologia, Brasilia, Distrito Federal. Brasil
Year:
Season: Ene-Feb
Volumen: 37
Number: 1
Pages: 269-272
Country: Brasil
Language: Portugués
Document type: Nota breve o noticia
Approach: Analítico
English abstract Major outbreaks of tomato begomoviruses (geminiviruses) in several tomato Lycopersicon esculentum Mill growing in many parts of Brazil have been imposing significant losses upon the tomato agribusiness, due to the introduction of the Bemisia argentifolii (Bemisia tabaci biotype B). Polymerase chain reaction (PCR) and hybridization are generally used for diagnosis. The PCR is a detection method with high sensitivity, however it has the disadvantage of producing false-positives, due to contamination, or false-negatives caused by inhibitors or because of the high primer specifity. The use of nucleic acid hybridization with radio-labelled probes is restricted due to the requirement of special infrastructure and handling experience, the risk for the user’s health and a regular radiochemical element supply. This study is aimed at demonstrating the usefulness of the hybridization method with non-radioactive probes for detection of a tomato begomoviruses in Brazil. The sensitivity of this method was high enabling the detection of 0.1fg of homologous DNA and in crude sap extract diluted up to 100-fold
Portuguese abstract O aumento na ocorrência de begomoviroses (geminiviroses) em tomateiros, Lycopersicon esculentum Mill., em várias regiões brasileiras, vem causando grandes prejuízos para o agronegócio de tomate, devido à ocorrência do inseto vetor, Bemisia argentifolii (Bemisia tabaci biotipo B). A diagnose é realizada em geral por “polymerase chain reaction” (PCR) ou por hibridização com sondas radioativas. A PCR é um método de alta sensibilidade, porém apresenta a desvantagem da possibilidade de obtenção de resultados falso-positivos, devido a contaminações, ou falso-negativos causados por inibidores contaminantes da reação, ou pela extrema especificidade dos iniciadores. A hibridização de ácidos nucléicos com sondas radioativas tem o seu uso limitado devido à necessidade de infra-estrutura especial, treinamento de pessoal, riscos para a saúde do manipulador e demanda constante de radioquímicos. O presente trabalho tem por finalidade demonstrar a viabilidade do uso do método de hibridização com sondas não-radioativas para a detecção de um begomovírus de tomateiro do Brasil. A sensibilidade do teste foi alta, obtendo-se detecção de até 0,1fg do DNA homólogo e em extrato bruto foliar diluído até 100 vezes
Disciplines: Agrociencias
Keyword: Fitopatología,
Hortalizas,
Lycopersicon esculentum,
Geminivirus,
Diagnóstico,
Tomate,
Detección
Keyword: Agricultural sciences,
Phytopathology,
Vegetables,
Lycopersicon esculentum,
Geminivirus,
Diagnosis,
Tomato,
Detection
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