Isolation and characterization of novel lectins from Canavalia ensiformis DC and Dioclea grandiflora Mart. ex Benth. seeds



Document title: Isolation and characterization of novel lectins from Canavalia ensiformis DC and Dioclea grandiflora Mart. ex Benth. seeds
Journal: Brazilian journal of plant physiology
Database: PERIÓDICA
System number: 000276170
ISSN: 1677-0420
Authors: 1

Institutions: 1Universidad Nacional de Colombia, Departamento de Química, Bogotá. Colombia
Year:
Season: Jul-Sep
Volumen: 17
Number: 3
Pages: 315-324
Country: Brasil
Language: Inglés
Document type: Artículo
Approach: Experimental, analítico
English abstract Two lectins were isolated from Canavalia ensiformis and Dioclea grandiflora seeds. Gel filtration produced a fraction corresponding to Con A or D. grandiflora lectin while erythroagglutination assays revealed a distinct fraction presenting a lectin that agglutinates human red blood cells (RBCs) but not rabbit RBCs. Hydrophobic interaction chromatography showed that the latter fraction yielded a protein that readily agglutinates human erythrocytes; the lectin was also purified by affinity chromatography on Lac-Sepharose showing similar properties to that of the Phenyl-Sepharose-purified lectin. Despite minor differences (carbohydrate content or A1%1cm), the two lectins showed similar molecular properties in that they consisted of two non-covalently linked monomers having a Mr of 29-30 kDa and their pI values indicated that both lectins were slightly acidic proteins. The C. ensiformis lectin (CEL-II) and D. grandiflora lectin (DGL-II) specifically recognised the H-type 2 blood group (alpha-L-Fuc (1-2)-beta-D-Gal (1-4)-beta-D-GlcNAc-O-R), while binding to H-type 1, H-type 3, H-type 4, Leª or Le y was weaker. Carbohydrate inhibition of erythroagglutination showed that simple sugars were weakly recognised by the lectins, if at all. The N-terminal region presented a unique sequence hitherto found only in some Diocleinae lectins (designated type II). The overall results confirmed the existence of a second distinct lectin type, phylogenetically close to Diocleinae species. The data indicate a functional similarity among lectins of this typ
Portuguese abstract Isolaram-se lectinas de sementes de Canavalia ensiformis e Dioclea grandiflora. Coluna de filtração em gel produziu uma fração correspondente Con A ou lectina de D. grandiflora, enquanto ensaios de eritroaglutinação revelaram uma fração distinta, com uma lectina que aglutinou glóbulos vermelhos humanos, mas não de coelho. Cromatografia de interação hidrofóbica mostrou que a fração contendo a última lectina rendeu uma proteína que prontamente aglutinou eritrócitos humanos. Essa lectina também foi purificada por cromatografia de afinidade em coluna Lac-Sepharose e mostrou propriedades similares àquela purificada da coluna de interação hidrofóbica. Apesar de pequenas diferenças (conteúdo de carboidratos ou A1%1cm), ambas lectinas mostraram propriedades moleculares semelhantes, consistindo em dois monômeros não-covalentemente ligados, com Mr de 29-30 kDa, e com valores de pI que as indicavam como proteínas pouco acídicas. As lectinas de C. ensiformis (CEL-II) e D. grandiflora (DGL-II) reconheceram especificamente o grupo sanguíneo "H-type 2" (alfa-L-Fuc (1-2)-beta-D-Gal (1-4)-beta-D-GlcNAc-O-R), com ligação mais fraca com os grupos "H-type 1, H-type 3, H-type 4, Leª ou Le y. Inibição de eritroaglutinação por carboidratos mostrou que açúcares simples foram fracamente reconhecidos pelas lectinas. A região N-terminal apresentou um seqüência única observada apenas em algumas lectinas de Diocleinae (denominadas tipo II). Os resultados confirmam a existência de um segundo tipo distinto de lectina, filogeneticamente próxima a espécies de Diocleinae. Os dados indicam uma similaridade funcional entre as lectinas desse tipo, que possuem características que as distinguem das clássicas lectinas Man/Glc
Disciplines: Biología,
Química
Keyword: Fisiología vegetal,
Fitoquímica,
Dioclea grandiflora,
Canavalia ensiformis,
Lectinas,
Semillas
Keyword: Biology,
Chemistry,
Plant physiology,
Phytochemistry,
Lectins,
Seeds,
Dioclea grandiflora,
Canavalia ensiformis
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