| Journal: | Brazilian archives of biology and technology |
| Database: | PERIÓDICA |
| System number: | 000331196 |
| ISSN: | 1516-8913 |
| Authors: | Lopes, Francis Julio Fagundes1 Queiroz, Marisa Vieira de1 Lima, Juliana Oliveira1 Silva, Viviane Aline Oliveira1 Araujo, Elza Fernandes de1 |
| Institutions: | 1Universidade Federal de Vicosa, Departamento de Microbiologia, Vicosa, Minas Gerais. Brasil |
| Year: | 2008 |
| Season: | Ene-Feb |
| Volumen: | 51 |
| Number: | 1 |
| Pages: | 27-34 |
| Country: | Brasil |
| Language: | Inglés |
| Document type: | Artículo |
| Approach: | Experimental, aplicado |
| English abstract | The presence of restriction enzymes in the transformation mixture improved the efficiency of transformation in Moniliophthora perniciosa. The influence of the vector shape (linear or circular), the patterns of plasmid integration in genomic sites and the influence of the promoter used to express the gene marker were also analyzed. The addition of BamHI or NotI increased the number of transformants by 3-10-fold and 3-fold, respectively, over the control without added enzyme. The use of pre-linearized plasmid did not increase the transformation efficiency in comparison with the circular plasmid. However, the frequency of multi-copy transformants increased significantly. The transformation procedure here reported resulted in better production of protoplasts and transformation efficiency. In addition, the time necessary for the detection of the first transformants and the number of insertions were reduced |
| Portuguese abstract | A presença de enzima de restrição na mistura de transformação aumentou a eficiência da transformação em Moniliophthora perniciosa. A influência da forma do vetor (linear ou circular), o padrão de integração do plasmídeo nos sítios genômicos e a influência do promotor usado para expressar o gene marcador foram também analisados. A adição de BamHI ou NotI aumentou o número de transformantes 3-10 vezes e 3 vezes, respectivamente, em relação ao controle sem a adição da enzima. O uso de plasmídeos pré-linearizados não aumentou a eficiência da transformação quando comparado à eficiência obtida com plasmídeos circulares. No entanto, a freqüência de transformantes multi-cópias aumentou significativamente. Juntos os procedimentos reportados aqui resultaram em processos mais eficientes de produção de protoplastos e transformação, onde o tempo necessário para o aparecimento dos transformantes e o número de inserções múltiplas foi reduzido |
| Disciplines: | Biología, Agrociencias |
| Keyword: | Genética, Enzimas de restricción, Transformación genética, Plásmidos, Moniliophthora perniciosa |
| Keyword: | Biology, Agricultural sciences, Genetics, Restriction enzymes, Genetic transformation, Plasmids, Moniliophthora perniciosa |
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