New method for early detection of two random amplified polymorphic DNA (RAPD) groups of Staphylococcus aureus causing bovine mastitis infection in Paraná State, Brazil



Document title: New method for early detection of two random amplified polymorphic DNA (RAPD) groups of Staphylococcus aureus causing bovine mastitis infection in Paraná State, Brazil
Journal: Brazilian archives of biology and technology
Database: PERIÓDICA
System number: 000330085
ISSN: 1516-8913
Authors: 1
2
2
3
1
Institutions: 1Universidade Federal do Parana, Divisao de Bioprocessos e Biotecnologia, Curitiba, Parana. Brasil
2Pontificia Universidade Catolica do Parana, Curitiba, Parana. Brasil
3Universidade Estadual de Ponta Grossa, Ponta Grossa, Parana. Brasil
Year:
Season: Mar-Abr
Volumen: 53
Number: 2
Pages: 353-360
Country: Brasil
Language: Inglés
Document type: Artículo
Approach: Experimental, aplicado
English abstract The aim of this work was to develop a fast and accurate molecular approach to allow early detection of two RAPD groups of S. aureus causing bovine mastitis. Seventy five S. aureus isolates from infected animals were characterized by RAPD. Genomic fragments isolated from the unique bands present in either group were cloned and sequenced. Based on the DNA sequences, specific primers were designed to allow for the simultaneous detection of either group by multiplex PCR of S. aureus DNA isolated from clinical and subclinical bovine mastitis. Results showed that these proposed primers set could be used to detect various clinical and subclinical S. aureus isolates as well as the detection of the microorganism in bulk milk. Their use as a specific method for effective and early diagnostic tool for S. aureus infection in dairy herds is suggested
Portuguese abstract Esta pesquisa objetivou o desenvolvimento de técnica rápida e eficiente para diagnosticar precocemente diferentes linhagens de S. aureus causadoras de mastite bovina. Como resultados da metodologia empregada, foram isoladas duas linhagens destas bactérias que causam diferentes tipos de mastite bovina. Os fragmentos de DNA genômico caracterizando ambas as linhagens, por meio de RAPD foram inseridos em vetor plasmidial pGEM e clonados por meio de clones T10 F1 de Escherichia coli. As seqüências obtidas permitiram desenhar iniciadores específicos para o reconhecimento de ambas as linhagens, os quais foram testados com amostras de S. aureus e com outras linhagens próximas. O diagnóstico por meios moleculares, pode ser realizado diretamente de amostras coletadas de rebanhos leiteiros assim como dos equipamentos de ordenha. A significância deste estudo consiste em um rápido e acurado método para localizar animais infectados, representando importante ferramenta no manejo do rebanho, na redução de custos com tratamentos e, rápida recuperação de rebanhos infectados
Disciplines: Medicina veterinaria y zootecnia
Keyword: Bovinos,
Mastitis bovina,
Marcadores moleculares,
RAPD,
Staphylococcus aureus
Keyword: Veterinary medicine and animal husbandry,
Bovines,
Bovine mastitis,
Molecular markers,
RAPD,
Staphylococcus aureus
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