Obtención de callos con estructuras embriogénicas de Stevia rebaudiana Bert. en medios de cultivo semisólidos



Document title: Obtención de callos con estructuras embriogénicas de Stevia rebaudiana Bert. en medios de cultivo semisólidos
Journal: Biotecnología vegetal
Database: PERIÓDICA
System number: 000347064
ISSN: 1609-1841
Authors: 1
2
1
1
2
Institutions: 1Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria, Estación Experimental Agropecuaria, Alem, Misiones. Argentina
2Universidad Central "Marta Abreu" de Las Villas, Instituto de Biotecnología de las Plantas, Santa Clara, Villa Clara. Cuba
Year:
Season: Abr-Jun
Volumen: 8
Number: 2
Pages: 91-98
Country: Cuba
Language: Español
Document type: Artículo
Approach: Experimental, aplicado
Spanish abstract El ajuste de un protocolo eficiente de embriogénesis somática en Stevia rebaudiana Bertoni serviría de apoyo a programas de mejoramiento genético por transformación genética, sobre lo cual existen hasta el momento muy pocos resultados en esta especie. Por estas razones, el objetivo de este trabajo fue obtener callos con estructuras embriogénicas de clones de yerba dulce a partir de plantas in vitro. Para la formación de callos se estudiaron variables como: el tipo de explante, condiciones de incubación e influencia del genotipo. Se empleó el medio de cultivo MS con diferentes reguladores de crecimiento solos o en combinación (2,4-D; 6-BAP; TDZ). Los callos fueron multiplicados en los mejores medios de cultivo y posteriormente fueron subcultivados a medios de cultivo que contenían 2,4-D o TDZ con 40 y 60 g.l -1 de sacarosa para inducir la formación de masas proembriogénicas. Se logró la formación de callos, luego de 45 días de cultivo en la oscuridad en medios de cultivo con 2.26 μM de 2,4-D y 2.22 μM de 6-BAP ó 1.13 μM de 2,4-D y 0.45 μM de TDZ, con el empleo de explantes foliares de plantas in vitro de yerba dulce. La multiplicación fue posible realizarla en los mismos medios de cultivo de formación de callos. Al subcultivarlos a medios de cultivo con 0.45 μM de 2,4-D más la adición de 40 g.l -1 de sacarosa se obtuvo la mayor cantidad de callos con desarrollo de masas proembriogénicas luego de 45-50 días de cultivo
English abstract The adjustment of an efficient protocol of somatic embryogenesis in Stevia rebaudiana Bertoni to support programs of genetic breeding by genetic transformation is necessary. Few results are registered up to the moment in this species. The objective of this work was to obtain calli with embryogenic structures from clones of Stevia in vitro plants. Different variables were studied for the formation of calli: explants type, incubation conditions and genotype influences. Culture medium MS with different growth regulators (2,4-D; 6-BAP; TDZ) was used. These were used alone or in combination. Calli were multiplied in the best culture media. Afterwards they were subcultured to culture medium containing 2,4-D or TDZ with 40 and 60 g.l -1 of sucrose to induce proembryogenic mass formation. Calli formation was achieved after 45 days of culture in darkness and in culture media with 2.26 μM 2,4-D and 2.22 μM 6-BAP or 1.13 μM 2,4-D and 0.45 μM of TDZ. Foliar explants of in vitro plants of Stevia were used. Multiplication was achieved in the same culture media for calli formation. The largest amount of calli with development of proembryogenic mass was obtained when subcultures to culture medium with 0.45 μM 2,4-D adding 40 g.l -1 of sucrose was carried out after 45-50 days of culture
Disciplines: Biología,
Agrociencias
Keyword: Biología celular,
Plantas para uso industrial,
Biotecnología,
Yerba dulce,
Stevia rebaudiana,
Mejoramiento genético,
Explantes foliares,
Callos embriogénicos,
Medios de cultivo,
Cultivo de tejidos
Keyword: Biology,
Agricultural sciences,
Cell biology,
Plants for industrial use,
Biotechnology,
Sweet herb,
Stevia rebaudiana,
Genetic improvement,
Culture media,
Tissue culture,
Leaf explants,
Embryogenic callus
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