Optimization of randomly amplified polymorphic DNA-polymerase chain reaction for molecular typing of Salmonella enterica serovar Typhi



Título del documento: Optimization of randomly amplified polymorphic DNA-polymerase chain reaction for molecular typing of Salmonella enterica serovar Typhi
Revista: Revista da Sociedade Brasileira de Medicina Tropical
Base de datos: PERIÓDICA
Número de sistema: 000282542
ISSN: 0037-8682
Autores: 1
2
3

Instituciones: 1Fundacao Oswaldo Cruz, Instituto Oswaldo Cruz, Rio de Janeiro. Brasil
2Universidade do Estado do Rio de Janeiro, Departamento de Microbiologia Medica, Rio de Janeiro. Brasil
3Fundacao Instituto Oswaldo Cruz, Centro de Pesquisas Aggeu Magalhaes, Recife, Pernambuco. Brasil
Año:
Periodo: Mar
Volumen: 37
Número: 2
Paginación: 143-147
País: Brasil
Idioma: Inglés
Tipo de documento: Artículo
Enfoque: Experimental
Resumen en inglés Optimization of the RAPD reaction for characterizing Salmonella enterica serovar Typhi strains was studied in order to ensure the reproducibility and the discriminatory power of this technique. Eight Salmonella serovar Typhi strains isolated from various regions in Brazil were examined for the fragment patterns produced using different concentrations of DNA template, primer, MgCl2 and Taq DNA polymerase. Using two different low stringency thermal cycle profiles, the RAPD fingerprints obtained were compared. A set of sixteen primers was evaluated for their ability to produce a high number of distinct fragments. We found that variations associated to all of the tested parameters modified the fingerprinting patterns. For the strains of Salmonella enterica serovar Typhi used in this experiment, we have defined a set of conditions for RAPD-PCR reaction, which result in a simple, fast and reproducible typing method
Resumen en portugués A otimização da reação de RAPD para a caracterização de cepas de Salmonella enterica sorovar Typhi foi estudada com o objetivo de assegurar a reprodutibilidade e o poder discriminatório desta técnica. Oito cepas de Salmonella sorovar Typhi isoladas de algumas regiões do Brasil foram usadas para examinar os padrões de fragmentação produzidos quando foram empregadas concentrações diferentes do DNA molde, do iniciador, do MgCl2 e da enzima Taq DNA polimerase. Com a utilização de dois diferentes perfis de ciclos termais de baixa estringência, foram comparados os padrões de bandeamento obtidos. Um conjunto de dezesseis iniciadores foi avaliado quanto à capacidade de produzir elevado número de fragmentos distintos. Observou-se que variações associadas a todos os parâmetros testados modificaram os padrões de bandeamento. Para as amostras de Salmonella enterica sorovar Typhi utilizadas neste experimento, definiu-se um conjunto de condições para a reação de RAPD-PCR que resultou num método de tipagem simples, rápido e reprodutível
Disciplinas: Biología
Palabras clave: Bacterias,
Genética,
Parasitología,
RAPD-PCR,
Salmonella enterica,
Brasil,
ADN
Keyword: Biology,
Bacteria,
Genetics,
Parasitology,
RAPD-PCR,
Salmonella enterica,
Brazil,
DNA
Texto completo: Texto completo (Ver HTML)