| Revista: | Dermatología (México, D.F.) |
| Base de datos: | PERIÓDICA |
| Número de sistema: | 000357163 |
| ISSN: | 0185-4038 |
| Autores: | Palma Ramos, Alejandro1 Castrillón Rivera, Laura Estela1 Becerril Parra, Diana Emma1 Zamora Alvarado, Rubén1 Aguirre Hernández, Ramón Miguel1 Espinosa Antúnez, Violeta Karen1 González Pacheco, José Roberto1 Padilla Desgarennes, Carmen2 |
| Instituciones: | 1Universidad Autónoma Metropolitana, Departamento de Sistemas Biológicos, Xochimilco, Distrito Federal. México 2Centro Dermatológico Pascua, Laboratorio de Micología, México, Distrito Federal. México |
| Año: | 2012 |
| Periodo: | Nov-Dic |
| Volumen: | 56 |
| Número: | 6 |
| Paginación: | 377-384 |
| País: | México |
| Idioma: | Español |
| Tipo de documento: | Artículo |
| Enfoque: | Analítico, descriptivo |
| Resumen en español | Antecedentes: la candidina es el extracto total obtenido de Candida albicans, y es la conjunción de proteínas de superficie e internas que se utiliza en la reacción intradérmica para el estudio de hipersensibilidad tardía. Se ha demostrado que C. albicans o sus diferentes antígenos estimulan la respuesta proliferativa de linfocitos in vitro. Se han realizado estudios de los principales componentes manoproteicos de C. albicans implicados en la inmunomodulación de las defensas del huésped. Entre las presentes en el extracto ácido se encuentra una proteína de 65 kDa (MP65), que es el principal blanco sobre el que se monta una respuesta por parte de las células T. Objetivo: estimular células mononucleares humanas in vitro con péptidos de extracto total y péptidos secretados al medio de cultivo por Candida albicans y la mezcla de ambos. Material y métodos: para obtener el extracto total (ET) de Candida albicans, se cultivó la cepa de referencia ATCC 10231 de este hongo en medio Sauton durante cinco días a 37ºC. La biomasa se separó por centrifugación y se solubilizó en solución salina isotónica; la rotura celular se hizo por sonicación y del sobrenadante obtenido se precipitaron las proteínas con solución saturada de sulfato de amonio, el cual fue removido posteriormente por diálisis. El extracto total se ajustó a una concentración de proteínas de 1 mg/mL. Para obtener proteínas liberadas al medio, a partir del medio de crecimiento de Candida albicans se procedió a precipitarlas y purificarlas con el mismo tratamiento descrito para el extracto total. Las células mononucleares humanas (CMH) se tomaron de sangre periférica y se purificaron con Lymphoprep; se lavaron con solución salina y se resuspendieron en medio de RPMI, ajustándose a 1x106 células/mL. Las citocinas se cuantificaron con la técnica de ELISA, utilizando los paquetes de R&D Systems Quantikine® Human IFN-g número de catálogo DIF50, y el paquete de R&D Systems |
| Resumen en inglés | Background: Candidin is a total extract obtained from Candida albicans, and a combination of both surface and internal protein, for the study of intradermal reaction of late hypersensitivity. It has been shown that C. albicans or its different antigens stimulate lymphocyte proliferative response in vitro. Several studies about the major mannoproteins components of C. albicans implicated in immunomodulation of host defenses were carried out. A protein of 65 kDa (MP65) is present in acid extract which is the primary target on which is mounted a response by T cells. Objective: To stimulate human mononuclear cells in vitro with peptides of total extract, and peptides secreted into the culture medium by Candida albicans and the mixture of both. Material and methods: To obtain the total extract (TE) of Candida albicans, strain ATCC 10231 was grown in Sauton media at 37ºC for five days. Biomass was separated by centrifugation and solubilized in isotonic saline. The cell disruption was made by sonication and the supernatant obtained by centrifugation proteins were precipitated using saturated ammonium sulfate which was subsequently removed by dialysis. ET was adjusted to a concentration of 1 mg/mL of protein. To obtain proteins released to the medium, directly from the growth medium of Candida albicans the precipitation and purification of proteins proceeded by the same treatment described for ET. Human mononuclear cells (MHC) were taken from peripheral blood and were purificated with Lymphoprep, washed with saline solution and mixed in the middle of RPMI, adjusting to 1x106 cells/mL. Cytokines quantification was carried out by the ELISA technique using the kit of R&D Systems Quantikine® Human IFNg number of catalogue DIF50, and the kit de R&D Systems Quantikine® Human IL-2 number of catalogue D2050. Results: Electrophoretic study of total extract of Candida albicans showed mainly one peptide of 60 to 65 kDa approximately, which is attributed to the stimulation |
| Disciplinas: | Medicina |
| Palabras clave: | Inmunología, Pruebas de sensibilidad, Antígenos, Candidina, Células mononucleares, Proliferación celular, Candida albicans |
| Keyword: | Medicine, Immunology, Sensitivity tests, Antigens, Candidine, Mononuclear cells, Cell proliferation, Candida albicans |
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