Criopreservação de embriões de suínos adicionando trealose aos crioprotetores etilenoglicol ou glicerol



Título del documento: Criopreservação de embriões de suínos adicionando trealose aos crioprotetores etilenoglicol ou glicerol
Revista: Ciencia rural
Base de datos: PERIÓDICA
Número de sistema: 000276580
ISSN: 0103-8478
Autores: 1

1
Instituciones: 1Universidade Federal de Pelotas, Faculdade de Veterinaria, Pelotas, Rio Grande do Sul. Brasil
Año:
Periodo: Ene-Mar
Volumen: 29
Número: 1
Paginación: 111-115
País: Brasil
Idioma: Portugués
Tipo de documento: Artículo
Enfoque: Experimental, analítico
Resumen en inglés The objectives of this study were to compare (a) the effects of trehalose incorporated to ethylene glycol and (b) the effect of ethylene glycol and glycerol associated to trehalose on the viability of frozen swine embryos. Treatment 1 consisted in 1.5 M ethylene glycol, treatment 2 in 1.5 M ethylene glycol plus 0.25 M trehalose and treatment 3 glycerol 1.5 M with 0.25 M trehalose. The embryos were frozen at expanded blastocyst stage. The rapid freezing method was used, with a cooling rate of 1°C/minute from the room temperature (± 25°C) to seeding (-7°C), and of 0.3°C/minute to -35°C, when the straws were plunged into liquid nitrogen (-196°C). Thawing was carried out in air during 30 seconds and in a water bath at 37°C during 30 seconds. Cryoprotectors were removed by the step-wise method. Embryo viability was observed microscopicaly imediately after thawing and when they reexpanded after being cultured for 18-24h in Medium 199 with 20% bovine foetal serum in 60 ml drops covered with mineral oil and incubated at 37°C in air with 6% CO2. The viability was 17.2%, 37.5% and 42.8% immediately after thawing, and 6.9%, 28.1% e 28.5% after a culture period of 18-24h, for treatments 1, 2 and 3, respectively. The results showed no differences (p>0.05) in viability among treatments when observation was made immediately after thawing. After culturing, viability rate was higher (p<0.05) in ethylene glycol with 0.25 M trehalose than in ethylene glycol only. Ethylene glycol and glycerol associated to trehalose showed no differences to cryoprotect swine embryos
Resumen en portugués Os objetivos deste trabalho foram: comparar (a) o efeito da adição de trealose ao crioprotetor etilenoglicol e, (b) o efeito dos crioprotetores etilenoglicol ou glicerol associados à trealose sobre a viabilidade de embriões congelados de suínos . A trealose foi adicionada à solução de congelamento de etilenoglicol 1.5 M nas concentrações de 0.0 M (tratamento 1) e 0.25 M (tratamento 2), e na concentração de 0.25 M (tratamento 3) à solução de congelamento de glicerol 1.5 M. Os embriões foram congelados no estágio de blastocisto expandido. O método de congelamento utilizado foi o rápido, sendo que desde a temperatura ambiente (± 25°C) até a temperatura do "seeding" (-7°C), a velocidade de resfriamento foi de 1°C/minuto. Após o "seeding", foi estabelecido um período de equilíbrio de 10 minutos à -7°C, sendo, a partir de então, adotada a velocidade de resfriamento de 0.3°C/minuto até a temperatura de -35°C. A seguir, as palhetas foram colocadas no nitrogênio líquido (-196°C). O descongelamento foi realizado mediante exposição das palhetas ao ar durante 30 segundos e, posteriormente, em banho-maria à 35°C, durante 30 segundos. A remoção dos crioprotetores foi realizada pelo método em etapas. O critério de viabilidade adotado consistiu na observação da reexpansão da cavidade blastocélica dos embriões, após período de cultivo in vitro de 18-24h. O cultivo foi feito em meio TCM 199 (tissue culture medium), acrescido de 20% de soro fetal bovino, em microgotas de 60 mil, sob óleo mineral em estufa com 6% CO2, 95% de umidad
Disciplinas: Medicina veterinaria y zootecnia
Palabras clave: Porcinos,
Zootecnia,
Biotecnología,
Embriones,
Cerdos,
Crioconservación,
Trehalosa,
Glicerol
Keyword: Veterinary medicine and animal husbandry,
Animal husbandry,
Swine,
Embryos,
Cryopreservation,
Trehalose,
Glycerol
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