| Revista: | Biotecnología aplicada |
| Base de datos: | PERIÓDICA |
| Número de sistema: | 000288303 |
| ISSN: | 0864-4551 |
| Autores: | Valdés, Jorge1 Mantilla, Ernesto Márquez, Gabriel Bonilla, Regla M Lugo, Victoria M Pérez, Mariela García, Yanara Narciandi, Emilio |
| Instituciones: | 1Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología, La Habana. Cuba |
| Año: | 2009 |
| Periodo: | Ene-Mar |
| Volumen: | 26 |
| Número: | 1 |
| Paginación: | 34-38 |
| País: | Cuba |
| Idioma: | Inglés |
| Tipo de documento: | Artículo |
| Enfoque: | Experimental, analítico |
| Resumen en español | El Factor de crecimiento epidérmico humano (FCE-h) es una proteína que posee una potente actividad mitógenica la cual se manifiesta en el incremento la velocidad de cicatrización de heridas y ulceras en diferentes tejidos del cuerpo humano. Durante los últimos años el Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología (CIGB) ha estado involucrado en diversos proyectos de terapias novedosas asociadas al uso del FCE-h. Actualmente existe la necesidad de aumentar de forma significativa la capacidad productiva de esta molécula en la misma instalación industrial para dar respuesta a la creciente demanda de este producto. El objetivo central de este trabajo fue el aumento del nivel de expresión de FCE-h mediante la optimización de las condiciones de cultivo. En el siguiente trabajo se estudió la influencia del medio de cultivo, el pH y la temperatura sobre la expresión del Factor de Crecimiento Epidérmico humano (FCE-h). Se logró un aumento de 1.8 veces en el nivel de expresión del FCE-h mediante la adición de 50 mg/L de histidina y leucina respecto al medio base. El medio de cultivo fue optimizado empleando un experimento factorial de superficie de respuesta. Se encontró un óptimo de concentración de extracto de levadura y peptona bacteriológica de 18 y 25 g/L, respectivamente, correspondiéndose con un nivel de expresión máximo de 3.5 mg/g. Este nivel de expresión es el máximo reportado para el FCE-h en levaduras. Por otra parte, se discute como es posible lograr un control de la proteolisis del FCE-h cuando se opera a un pH de 6.5 y una temperatura de 25 °C |
| Resumen en inglés | Human Epidermal Growth Factor (hEGF) is a protein molecule with potent mitogenic activity, increasing the rate of wound and ulcer healing in different tissues of the human body. In recent years, the Center for Genetic Engineering and Biotechnology (CIGB) has carried out projects at the developmental stages for the application of hEGF in novel therapies. It is now necessary to increase production capacity within the same facility, to meet the increasing demand of this product.The aim of this work was to increase hEGF expression levels by optimizing the culture conditions. The culture media, pH and temperature dependency of hEGF expression and degradation rate were studied. An increase of 1.8 times of the hEGF expression level was achieved by adding to the medium 50 mg/L of histidine and leucine. A factorial design experiment was applied to optimize the yeast extract and bacteriological peptone concentration in the culture media. The statistical analysis of response surface predicted that using 18 g/L of yeast extract and 25 g/L of bacteriological peptone improved the hEGF expression level up to 3.5 mg/g. This is the highest expression level reported for hEGF in yeast up to now. Furthermore, the form in which the hEGF degradation rate was reduced to less than 10% in fermenters when the culture was made on the optimized medium at pH 6.5 and 25 °C, is discussed |
| Disciplinas: | Biología, Medicina |
| Palabras clave: | Bacterias, Terapéutica y rehabilitación, Biotecnología, Factor de crecimiento epidérmico, Medios de cultivo, Proteólisis, Saccharomyces cerevisiae |
| Keyword: | Biology, Medicine, Bacteria, Therapeutics and rehabilitation, Epidermal growth factor, Culture media, Proteolysis, Saccharomyces cerevisiae |
| Texto completo: | Texto completo (Ver PDF) |
