| Revista: | Biotecnología aplicada |
| Base de datos: | PERIÓDICA |
| Número de sistema: | 000322810 |
| ISSN: | 0864-4551 |
| Autores: | Cremata, José A1 Montesino, Raquel1 Toledo, Jorge R1 Sánchez, Oliberto1 Rodríguez, Elsa1 Rodríguez, María P1 |
| Instituciones: | 1Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología, La Habana. Cuba |
| Año: | 2008 |
| Volumen: | 25 |
| Número: | 4 |
| Paginación: | 367-372 |
| País: | Cuba |
| Idioma: | Español |
| Tipo de documento: | Artículo |
| Enfoque: | Experimental, aplicado |
| Resumen en español | El análisis de la N-glicosilación de la eritropoyetina humana (EPOh) recombinante, expresada mediante transducción adenoviral de células epiteliales mamarias de una línea celular de cabra no transformada (línea GMGE; EPOh- GMGE) y en la leche de cabra (EPOh-Lc), se realizó mediante separación en HPLC en fase normal Amida-80 e intercambio aniónico de los oligosacáridos liberados enzimáticamente. Luego, estos oligosacáridos se marcaron con el fluoróforo ácido 4-aminobenzoico (4ABA) y su estructura se evaluó por espectrometría de masas MALDI, ESIMS y LC/MS. Las estructuras de los N-glicanos más abundantes de la EPOh-GMGE son de tipo multiantenarias monosialiladas, fucosiladas en el núcleo y también en las antenas. La EPOh-Lc presentó N-glicanos poco ramificados y fucosilados mayormente en el núcleo. La fracción cargada mostró estructuras monosialiladas que contenían ácido siálico en las formas N-Acetiladas y N-Glicoliladas en una relación 1:1, principalmente enlazados α2,6 al extremo no reductor de la cadena oligosacarídica, mientras que en la EPOh-GMGE solo se detectaron ácidos siálicos terminales en su forma N-Acetilada. Un hallazgo importante fue la presencia mayoritaria de N-glicanos biantenados con motivos de lactosadiamina (GalNAc-GlcNAc) neutros o sialilados en la EPOh-Lc, a diferencia de la EPOh-GMGE donde los N-glicanos con estos motivos resultaron minoritarios. Este tipo de terminal no reductor no ha sido descrito en la EPOh expresada en células CHO, donde los glicanos muestran estructuras multiantenarias altamente sialiladas. Estos hallazgos enfatizan la diferencia entre la población de N-glicanos de una glicoproteína dada, en dependencia del tipo celular y el entorno en que esta se expresa |
| Disciplinas: | Química |
| Palabras clave: | Bioquímica, Química farmacéutica, Glicosilación, Eritropoyetina humana recombinante, Transducción viral, Glándula mamaria, Perfil cromatográfico |
| Keyword: | Chemistry, Biochemistry, Medicinal chemistry, Glycosylation, Human recombinant erythropoietin, Viral transduction, Mammary gland, Chromatographic profile |
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