| Revista: | Biotecnología aplicada |
| Base de datos: | PERIÓDICA |
| Número de sistema: | 000275538 |
| ISSN: | 0864-4551 |
| Autores: | Pupo, Elder1 Hardy, Eugenio2 |
| Instituciones: | 1Universidad de La Habana, Instituto de Ciencia y Tecnología de los Materiales, La Habana. Cuba 2Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología, División de Química-Física, La Habana. Cuba |
| Año: | 2009 |
| Periodo: | Ene-Mar |
| Volumen: | 26 |
| Número: | 1 |
| Paginación: | 1-15 |
| País: | Cuba |
| Idioma: | Español, inglés |
| Tipo de documento: | Artículo |
| Enfoque: | Descriptivo |
| Resumen en español | Las bacterias Gram negativas sintetizan de manera frecuente un gran número de especies moleculares de lipopolisacáridos (LPS). La elevada heterogeneidad estructural de los LPS y su tendencia a formar agregados moleculares hacen extremadamente difícil el fraccionamiento de sus especies moleculares. La aplicación de métodos cromatográficos de forma individual ha permitido la obtención de fracciones de LPS poco homogéneas. Con la combinación de principios cromatográficos ortogonales, solo se ha logrado la purificación hasta homogeneidad química de los LPS de tipo rugoso más simples. Ello ha determinado que los esfuerzos dirigidos al aislamiento de LPS más homogéneos se centren en el uso de la electroforesis en el gel plano. Los métodos de electroforesis son capaces de separar especies de masas moleculares cercanas de LPS más complejos de tipo liso. Consecuentemente, sobre esta base se ha desarrollado una nueva metodología que permite el aislamiento de LPS intactos de tipo rugoso o liso hasta homogeneidad electroforética. Con ella es posible el análisis estructural sensible por espectrometría de masas y la medición de la actividad LAL (Limulus Amoebocyte Lysate) de especies individuales de LPS, compuestas de unas pocas especies químicas. Esta metodología ha abierto las puertas hacia la posibilidad de combinar la electroforesis con otros principios ortogonales de separación, un próximo paso que podría facilitar la obtención de preparaciones químicamente homogéneas a partir de mezclas de LPS complejas |
| Resumen en inglés | Gram negative bacteria frequently synthesize a great number of lipopolysaccharides (LPS) molecular species, the high LPS structural heterogeneity and its trend to conform molecular aggregates make the functioning of its molecular species extremely difficult. The application of chromatographic methods individually has allowed the obtainment of little homogeneous LPS fractions. With the combination of orthogonal chromatographic principles, only the purification of the simplest rough type LPS up to chemical homogeneity has been reached. This has determined that efforts aimed at more homogeneous LPS isolation is focused on the use of electrophoresis in smooth gel. Electrophoresis methods are capable of separating species of molecular masses next to the most complex smooth type LPS. Consequently upon this basis, a new methodology allowing the isolation of intact LPS of either rough or smooth types up to electrophoretic homogeneity has been developed. Under such methodology, sensible structural analysis through mass spectrometry and LAL (Limulus Amebocyte Lysate) activity of LPS individual species is feasible, composed of just a few chemical species. This methodology has proved the possible way of combining electrophoresis with other orthogonal separation principles, a further step which could guarantee the obtainment of chemically homogeneous preparations from complex LPS mixtures |
| Disciplinas: | Biología, Química |
| Palabras clave: | Bacterias, Bioquímica, Biotecnología, Bacterias Gram negativas, Lipopolisacáridos, Cromatografía, Electroforesis, Espectrometría de masas, Biología molecular |
| Keyword: | Biology, Chemistry, Bacteria, Biochemistry, Gram negative bacteria, Lipopolysaccharides, Chromatography, Electrophoresis, Mass spectrometry, Molecular biology |
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