Método fácil y confiable para teñir núcleos en hongos del complejo Rhizoctonia



Título del documento: Método fácil y confiable para teñir núcleos en hongos del complejo Rhizoctonia
Revista: Bioagro
Base de datos: PERIÓDICA
Número de sistema: 000433891
ISSN: 1316-3361
Autores: 1
Instituciones: 1Universidad de Los Andes, Facultad de Ciencias Forestales y Ambientales, Mérida. Venezuela
Año:
Periodo: Sep-Dic
Volumen: 20
Número: 3
Paginación: 215-219
País: Venezuela
Idioma: Español
Tipo de documento: Nota breve o noticia
Enfoque: Experimental, analítico
Resumen en español En el complejo Rhizoctonia la morfología hifal y configuración del septo permiten diferenciar los géneros, mientras que las especies pueden ser distinguidas por la condición nuclear y el grosor de hifas “guías” ó la morfometría del teleomorfo. Para caracterizar las especies en uni, bi y multinucleadas se han desarrollado varios métodos de tinción nuclear con acridina naranja, azules de anilina y tripano, diamina fenil indol (DAPI), giemsa, hematoxilina, orceina y safranina O. Algunos de esos procedimientos son rápidos, pero otros requieren técnicas especiales (fluorescencia) o consumen mucho tiempo y limitan la cantidad de muestras a procesar. Un nuevo método fue desarrollado durante análisis de anastomosis (AGs) en aislamientos de R. solani que atacan la papa cultivada en Mérida, Venezuela. El procedimiento es rápido, fácil, confiable y permite la manipulación simultánea de un número considerable de especimenes, y tanto el núcleo como el nucléolo conservan su integridad. El método fue probado exitosamente en 10 patrones de AGs de R. solani, y permitió separar 173 cepas multinucleadas y 3 binucleadas, todas del género Rhizoctonia. El método fue efectivo utilizando sustrato de agua-agar 2,4 % más PDA 0,39 %, en cultivos de 18 a 48 h fijado con formaldehído 4 % y coloreado con fucsina ácida 0,025 en ácido láctico 50 %
Resumen en inglés Hyphal morphology and septal structure configuration of the fungi included in Rhizoctonia complex allows for differentiation of genus, while species may be distinguished by nuclear condition and thickness of the runner hyphae, or teleomorph morphometry. For characterization of species in uni, bi, and multinucleate diverse methods of staining have been developed using acridine orange, aniline and trypan blue, diamine phenyl indole (DAPI), giemsa, hematoxiline, orcein and saphranin O. Some of these procedures are quick to perform, while others require special techniques (fluorescence) or are time consuming, which impose a limit on the number of samples that can be processed at a time. A new method of nuclei staining was developed during the analysis of anastomosis groups (AGs) of R. solani strains isolated from potato plants cultivated in Mérida, Venezuela. The procedure is quick, easy, and reliable, and allows for simultaneous manipulation of a significant number of samples, and both nucleus and nucleolus maintain their integrity. The method was successfully assayed in 10 different AGs testers of R. solani, and allowed separation of 173 multinucleate and 3 binucleate Rhizoctonia strains. Method effectiveness depends upon growth medium (water agar 2.4 % plus PDA 0.39 %), culture age (18-48 h), fixing agent (formaldehyde 4 %), and stain (fuchsin acid 0.025 % in lactic acid 50 %)
Disciplinas: Biología,
Agrociencias
Palabras clave: Anatomía e histología,
Hortalizas,
Hongos,
Hifas,
Rhizoctonia,
Papa,
Fitopatología
Keyword: Anatomy and histology,
Vegetables,
Fungi,
Hyphae,
Rhizoctonia,
Potato,
Phytopathology
Texto completo: http://ve.scielo.org/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1316-33612008000300009&lng=es&nrm=iso&tlng=es