| Revista: | Acta ortopedica brasileira |
| Base de datos: | PERIÓDICA |
| Número de sistema: | 000286416 |
| ISSN: | 1413-7852 |
| Autores: | Bittencourt, Renata Aparecida de Camargo1 Pereira, Hamilton Rosa Felisbino, Sergio Luis Murador, Priscila Oliveira, Ana Paula Ehrhardt de Deffune, Elenice |
| Instituciones: | 1Universidade Estadual Paulista "Julio de Mesquita Filho", Faculdade de Medicina de Botucatu, Botucatu, Sao Paulo. Brasil |
| Año: | 2006 |
| Volumen: | 14 |
| Número: | 1 |
| Paginación: | 22-24 |
| País: | Brasil |
| Idioma: | Portugués |
| Tipo de documento: | Artículo |
| Enfoque: | Experimental |
| Resumen en inglés | Mesenchymal Stem Cells (MSCs) have a high ability to renew and differentiate themselves into various lineages of conjunctive tissues. This study aimed to isolate the MSCs from murine bone marrow by using two different growth media and to characterize them with immunostaining with antivimentin antibody. We used six 2-week old BALB/c mice. Bone marrow was collected from mice's tibial and femoral channels and re-suspended in a final strength of 6x105 in Knockout-DMEM and high-glucose-DMEM media, supplemented by 10% FBS, and kept in a humidified 5% CO2 incubator at 37º C for 72 h, when non-adherent cells were removed during the change of medium. The number and density of adherent fibroblast-like colonies was greater with the Knockout-DMEM medium (within 5 days of culture) versus 10-20 days in DMEM-high glucose to get the same cellular concentration. The cells in both groups were highly positive for antivimentin antibody, characterizing them as MSCs. Obtaining MSCs as quickly as possible is essential for cell therapy field, especially when those cells are intended to be used for the repair of tissues from mesenchymal sources |
| Resumen en portugués | As Células-Tronco Mesenquimais (CTMs) têm alta capacidade de se renovar e diferenciar em várias linhagens de tecido conjuntivo. Este trabalho teve como objetivo isolar as CTMs da medula óssea de camundongos utilizando dois diferentes meios de cultura e caracterizá-las através de imuno-marcação com anti-vimentina. Foram utilizados 6 camundongos BALB/c com 15 dias de idade. A medula óssea foi coletada do canal medular das tíbias e fêmures dos camundongos e ressuspensas em uma concentração final 6x10(5), em meio Knockout- DMEM e DMEM alta concentração de glicose, suplementados com 10% SBF, mantidas em estufa a 37° C em uma atmosfera úmida a 5% de CO2 e 95% de ar por 72 horas, quando as células não aderentes foram removidas durante a troca do meio. O número e densidade de células com morfologia fibroblastóide foram maior no meio Knockout- DMEM em cinco dias de cultura versus 10-20 dias para conseguir a mesma concentração celular com o DMEM alta concentração de glicose. As células de ambos grupos apresentaram intensa marcação com anticorpo anti-vimentina, caracterizando-as como CTMs. A obtenção mais rápida das CTMs é fundamental para o campo da terapia celular, principalmente quando se deseja utilizar estas células no reparo de tecidos de origem mesenquimal |
| Disciplinas: | Medicina |
| Palabras clave: | Cirugía, Biología celular, Vimentina, Células madre, Cultivo de células, Terapia celular, Médula ósea |
| Keyword: | Medicine, Surgery, Cell biology, Vimentine, Stem cells, Cell culture, Cell therapy, Bone marrow |
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