Pancreatic islet isolation by mechanical-enzymatic separation, stationary collagenase digestion and dextran discontinuous density gradient purification: experimental study in dogs



Título del documento: Pancreatic islet isolation by mechanical-enzymatic separation, stationary collagenase digestion and dextran discontinuous density gradient purification: experimental study in dogs
Revista: Acta cirurgica brasileira
Base de datos: PERIÓDICA
Número de sistema: 000286082
ISSN: 0102-8650
Autores: 1



Instituciones: 1Faculdade de Medicina do ABC, Sao Paulo. Brasil
Año:
Periodo: Mar-Abr
Volumen: 17
Número: 2
Paginación: 89-94
País: Brasil
Idioma: Inglés
Tipo de documento: Artículo
Enfoque: Experimental
Resumen en inglés The prospects for allotransplantation of pancreatic islets in man depend on the development of methods that provide sufficient quantities of pancreatic islets from a single donor, which are capable, when transplanted, of achieve the normalization of carbohydrate metabolism. Objective: Evaluate the efficacy of the isolation of Langerhans islets from dogs, by means of mechanical-enzymatic separation technique with stationary digestion using collagenase, and purification with a discontinuous dextran density gradient. Methods: The counting of islet numbers and evaluation of their sizes was accomplished by staining with diphenylthiocarbazone and using stereoscopic microscopes equipped with eyepiece reticule for the measurement of average diameters of stained islets. Results: The results disclosed that the average number of islets isolated was 81032.20 ± 24736.79 and the average number of islets isolated per kg of body weight was 6938.70 ± 1392.43. The average number of islets isolated per kg of body weight showed significant correlation with body weight and weight of the pancreas resected. Conclusion: The number of islets isolated, of a single donor, by mechanical-enzymatic separation, stationary collagenase digestion and discontinuous dextran density gradient purification can be sufficient to success of pancreatic islets transplant in dogs
Resumen en portugués A perspectiva do alotransplante de ilhotas pancreáticas no homem está na dependência do desenvolvimento de métodos que propiciem quantidades suficientes de ilhotas pancreáticas, originadas de doador único, capazes de, quando transplantadas, levarem à normalização do metabolismo dos hidratos de carbono. Objetivo: Avaliar, em cães, a eficácia do isolamento das ilhotas de Langerhans por meio da técnica de separação mecânica-enzimática, digestão estacionária com colagenase e purificação pelo gradiente de densidade descontínua de dextran. Métodos: A contagem do número e avaliação do tamanho das ilhotas foi realizada pela coloração com difeniltiocarbazona e exame em microscópio estereoscópico munido de retícula ocular para medição do diâmetro médio das ilhotas coradas. Resultados: O número médio de ilhotas isoladas foi de 81032,20 ± 24736.79 e o número médio de ilhotas/kg de peso corpóreo foi de 6938,70± 1392,43. O número médio de ilhotas/kg de peso corpóreo obtido mostrou correlação significativa com peso corpóreo e peso do pâncreas extirpado. Conclusão: Estes resultados sugerem que o número de ilhotas isoladas, de um único doador, por meio da separação mecânica-enzimática, digestão estacionária com colagenase e purificação pelo gradiente de densidade descontínua de dextran pode ser suficiente para o sucesso do transplante de ilhotas pancreáticas em cães
Disciplinas: Medicina
Palabras clave: Cirugía,
Endocrinología,
Medicina experimental,
Islotes de Langerhans,
Aislamiento,
Trasplantes,
Diabetes,
Modelos experimentales
Keyword: Medicine,
Endocrinology,
Experimental medicine,
Surgery,
Langerhans islets,
Isolation,
Transplantation,
Diabetes,
Experimental models
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