| Revista: | Vaccimonitor (La Habana) |
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| Número de sistema: | 000604358 |
| ISSN: | 1025-028X |
| Autores: | Cuello, Maribel1 Cabrera, Osmir1 Rodríguez, Yaimara1 Thurheim, Gro2 Norheim, Gunnstein2 Cabrera, Rubén Adonis1 Álvarez, Maydelis1 Álvarez, Maylín1 Blain, Kirenia1 Naess, Lisbeth2 Rosenqvist, Einar2 García, Luis1 |
| Instituciones: | 1Instituto Finlay, Centro de Investigación-Producción de Vacunas, La Habana. Cuba 2Norwegian Institute of Public Health, Oslo. Noruega |
| Año: | 2013 |
| Periodo: | Sep-Dic |
| Volumen: | 22 |
| Número: | 3 |
| Paginación: | 36-42 |
| País: | Cuba |
| Idioma: | Español |
| Tipo de documento: | Artículo |
| Resumen en español | Desde hace varios años el Instituto Finlay, en colaboración con el Instituto Noruego para la Salud Pública, trabajan en un proyecto para la obtención de candidatos vacunales a partir de vesículas de membrana externa (VME) de Neisseria meningitidis serogrupos A, W135 y X. Por ello es necesario establecer las especificaciones de calidad para el lipopolisacárido (LPS), principal causante de la pirogenicidad de estas vacunas. El objetivo de este reporte fue establecer las condiciones del SDS-PAGE como método de control de la calidad de las VME como ingrediente farmacéutico activo (IFA), provenientes de N. meningitidis serogrupos A, W135 y X. Se determinaron los inmunotipos y las concentraciones de LPS contaminantes, para lo cual se utilizaron geles de SDS-PAGE al 15% y muestras de LPS de los diferentes serogrupos de N. meningitidis. Se realizó el revelado de los geles con tinción con plata específica para LPS y los resultados se analizaron en un densitómetro GS-800 (Bio-Rad , controlado por el programa "Quantity One". Se obtuvieron curvas patrones para cada LPS que determinaron la concentración de LPS en estas muestras y se comprobó la utilidad del método al cuantificar la concentración de LPS en muestras de IFAs de VME de los diferentes serogrupos de N. meningitidis. Así se estableció la metodología para determinar la concentración de LPS de N. meningitidis serogrupos A, X y W135 en muestras de IFA de VME con el SDS-PAGE y se confirmaron las especificaciones de calidad establecidas para este parámetro. |
| Resumen en inglés | For several years, Finlay Institute, in collaboration with the "Norwegian Institute of Public Health", is working in a project to obtain a vaccinal candidate from outer membrane vesicles (OMV) of N. meningitis serogroups A, W135 and X. To establish the quality specifications dealing with lipopolysaccharides (LPS), main cause of the pirogenicity of vaccines, is a necessity in this project. This work aims at establishing the conditions of SDS-PAGE to be used as a method for the quality control of the OMV as active pharmaceutical ingredient obtained from N. meningitidis serogroups A, W135 and X. The immunotypes of LPS were determined in studies as well as their concentrations as contaminants of OMV. SDS-PAGE gels at 15% and LPS samples from different serogroups were used; these gels were tinted with silver, specific for LPS, and the results were analyzed in a densitometer GS-800 (Bio-Rad) controlled by the program "Quantity One". As a result, LPS profile curves for each serogroup were obtained and the concentration of residual LPS in the OMV of different serogroups of N. meningitidis was quantified. As conclusion, the methodology to determine the concentration of LPS from N. meningitidis serogroups A, X and W135 in samples of OMV with SDS-PAGE was established, in addition the established quality specifications for this parameter were confirmed. |
| Disciplinas: | Biología, Química |
| Palabras clave: | Bacterias, Bioquímica |
| Keyword: | Bacteria, Biochemistry |
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