| Revista: | Revista de la Facultad de Ciencias Médicas de Córdoba |
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| Número de sistema: | 000582132 |
| ISSN: | 0014-6722 |
| Autores: | Brunetto, M1 Castro, G1 Cabrera, L1 Weiss, J1 Marinangeli, P1 Barbas, G1 Guignard, S1 |
| Instituciones: | 1Departamento Laboratorio Central - Ministerio de Salud de Córdoba, |
| Año: | 2022 |
| Volumen: | 79 |
| Número: | s/n |
| País: | Argentina |
| Idioma: | Español |
| Resumen en inglés | Vertical transmission of Trypanosoma cruzi (T. cruzi) infection accounts for an increasing proportion of new Chagas disease cases. Direct methods from blood samples (micromethod) are used for the diagnosis of vertically transmitted Chagas infection. Nevertheless, molecular methods are more sensitive than the aforementioned techniques and allow parasite load quantification. This study aimed to evaluate the real-time PCR method (qPCR) for the detection of T. cruzi DNA in blood samples from children born to chronically infected mothers. Samples of patients from different public hospitals in the Province of Córdoba were processed. Four successive blood samples were obtained from each patient at different stages: the first and the second one were taken at birth and 30-45 days later, respectively, and both were examined by micromethod and qPCR. The third sample was collected at 6-7 months and analyzed by qPCR and serological test; and the fourth specimen at 10-18 months, and was analyzed by serology testing. Blood samples were treated with Guanidine-EDTA, and automated nucleic acid extraction and qPCR with a commercial kit were performed.Between May 2021 to May 2022, 72 patients were included, and a total of 111 samples were analyzed. Out of the total, 6 were positive by qPCR, and one of them was also positive by the micromethod. Regarding the direct diagnosis method, the sensitivity and specificity for qPCR were 100,0% and 95,5%, respectively. Moreover, nineteen third samples were studied until July 2022; one resulted positive by qPCR and serology test. In 10 samples with negative results by serology test, perinatal infection was discarded after 10 months. These results were consistent with the qPCR ones. The positive samples belonged to 4 patients: one, whose sample taken at birth was positive by both, micromethod and qPCR, and the other 3 patients were only positive by qPCR in the first, second and third samples. Molecular methods are more efficient than conventional techniques for the detection of T. cruzi, which is key to an early diagnosis of perinatal infection. These results will allow us to propose a new diagnostic algorithm and will avoid the underdiagnosis of patients with possible acute perinatal infection. |
| Resumen en español | El Chagas perinatal se ha convertido en la principal vía de generación de nuevos casos de infección por Trypanosoma cruzi. El diagnóstico de Chagas vertical consiste en la búsqueda del parásito en sangre mediante métodos directos que carecen de sensibilidad. Los métodos moleculares son más sensibles que los métodos directos y permiten cuantificar la carga parasitaria. El objetivo del trabajo fue evaluar la técnica de PCR tiempo real (qPCR) para la detección cuantitativa del ADN de T. cruzi en muestras de sangre de niños nacidos de madres con infección confirmada.En el estudio se evaluaron muestras de pacientes provenientes del sub-sector público de la provincia de Córdoba. A cada paciente se le indicaron 4 muestras: 1°) al nacimiento y 2°) 30-45 días de vida, para micrométodo y qPCR. Las siguientes muestras: 3°) 6-7 meses, para qPCR y serología y 4°) 10-18 meses para serología. La muestra de sangre se trató con Guanidina-EDTA y la extracción de ácidos nucleicos se realizó de forma automatizada. Para la qPCR se utilizó un reactivo comercial.En el período del 05-2021 al 07-2022, se estudiaron un total de 111 primeras y segundas muestras, correspondientes a 72 niños. Del total, 6 muestras resultaron positivas por qPCR y una de ellas también resultó positiva por micrométodo. En relación al diagnóstico directo, la sensibilidad y especificidad de la qPCR evaluada fue 100,0% y 95,5%, respectivamente. Al 07-2022 se estudiaron además 19 terceras muestras, una resultó positiva por qPCR y presentó serología reactiva para Chagas. En 10 muestras con serología no reactiva, se descartó infección perinatal luego de los 10 meses, siendo estos resultados concordantes con la qPCR. Las muestras positivas corresponden a 4 pacientes: uno con micrométodo y qPCR positivas en la primera muestra y 3 con qPCR positivas en la 1°, 2° y/o 3°muestra, con micrométodo negativo.Las técnicas moleculares se adelantan a las técnicas convencionales para detección del parásito, siendo significativo su aporte en el diagnóstico temprano de Chagas perinatal. Los resultados obtenidos, permitirían elaborar un nuevo algoritmo diagnóstico y evitar la pérdida de pacientes con posible infección aguda debida a transmisión vertical. |
| Palabras clave: | trypanosoma cruzi, reacción en cadena de la polimerasa, técnicas de diagnóstico molecular, enfermedad de chagas |
| Keyword: | trypanosoma cruzi, chagas disease, molecular methods |
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