Immunohistochemical detection of Clostridia species in paraffin-embedded tissues of experimentally inoculated guinea pigs



Título del documento: Immunohistochemical detection of Clostridia species in paraffin-embedded tissues of experimentally inoculated guinea pigs
Revista: Pesquisa veterinaria brasileira
Base de datos: PERIÓDICA
Número de sistema: 000301602
ISSN: 0100-736X
Autores: 1




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Instituciones: 1Universidade Federal de Minas Gerais, Escola de Veterinaria, Belo Horizonte, Minas Gerais. Brasil
2Ministerio da Agricultura, Pecuaria e Abastecimento, Laboratorio Regional de Apoio Animal, Belo Horizonte, Minas Gerais. Brasil
3Fundacao Instituto Oswaldo Cruz, Instituto Oswaldo Cruz, Rio de Janeiro. Brasil
4University of California, School of Veterinary Medicine, Davis, California. Estados Unidos de América
Año:
Periodo: Ene-Mar
Volumen: 25
Número: 1
Paginación: 4-8
País: Brasil
Idioma: Inglés
Tipo de documento: Artículo
Enfoque: Experimental, analítico
Resumen en inglés Blackleg is caused by Clostridium chauvoei, whereas malignant oedema is caused by C. chauvoei, C. septicum, C. sordellii, C. perfringens type A, and/or C. novyi type A. Anti-C. chauvoei, anti-C. septicum, anti-C. sordellii and anti-C. novyi type A polyclonal antibodies were produced in rabbits and purified in a column of DEAE-cellulose. Aliquots of the antisera were conjugated with fluorescein isothiocyanate and the remaining was used for the streptavidin biotin peroxidase technique (SBPT). SBPT was standardized to detect C. chauvoei, C. septicum, C. sordellii and C. novyi type A in formalin-fixed, paraffin-embedded tissues of guinea pigs. SBPT was compared to a fluorescent antibody technique (FAT). Sections and smears of muscle from inoculation area (MIA), heart, liver, spleen and kidney, were obtained for both SBPT and FAT. Cross-reactions between the different Clostridial species were not observed. C. chauvoei and C. septicum were detected in all specimens from the animals inoculated with these microorganisms, while only sections of muscle obtained from all the animals inoculated with C. sordellii and C. novyi type A were positive. The same results observed by the SBPT, were obtained on tissue smears of these microorganisms stained by the FAT. The results indicate that SBPT is suitable for detection of C. chauvoei, C. septicum, C. sordellii and C. novyi type A in formalin-fixed, paraffin-embedded tissues of guinea pigs
Resumen en portugués O carbúnculo sintomático é causado pelo Clostridium chauvoei, enquanto o edema maligno é causado pelo C. chauvoei, C. septicum, C. sordellii, C. perfringens tipo A, e/ou C. novyi tipo A. Corpos policlonais anti-C. chauvoei, anti-C. septicum, anti-C. sordellii and anti-C.novyi tipo A foram produzidos em coelhos e purificados em uma coluna de DEAE-celulose. Alíquotas das imunoglobulinas foram conjugadas com isotiocianato de fluoresceína e o restante foi usado na técnica de streptavidina biotina peroxidase (SBP). SBP foi padronizada para detectar C. chauvoei, C. septicum, C. sordellii e C. novyi tipo A em tecidos de cobaias fixados em formol e incluídos em parafina. A mesma foi comparada com a técnica de imunofluorescência direta (IFD). Secções e impressões do músculo da área de inoculação, coração, fígado, baço e rim, foram obtidas para ambas as técnicas. Nenhuma reação cruzada foi observada quando tecidos inoculados com outras espécies de Clostridia foram tratadas com esses quatro anticorpos primários. C. chauvoei e C. septicum foram detectados em todos os espécimes provenientes dos animais inoculados com esses microrganismos, enquanto somente secções de músculo obtidas de todos os animais inoculados com C. sordellii e C. novyi tipo A foram positivas. Os mesmos resultados observados pela técnica de SBP, foram obtidos em impressões de tecidos desses microrganismos corados pela IFD. Os resultados indicam que a técnica de SBP permite a detecção de C. chauvoei, C. septicum, C. sordellii e C. novyi tipo A em tecidos de cobaias fixados em formol e incluídos em parafina
Disciplinas: Medicina veterinaria y zootecnia,
Biología
Palabras clave: Medicina veterinaria,
Parasitología,
Histología,
Cobayos,
Clostridium,
Edema,
Fluorescencia,
Antibióticos
Keyword: Veterinary medicine and animal husbandry,
Biology,
Veterinary medicine,
Parasitology,
Histology,
Guinea pigs,
Clostridium,
Edema,
Fluorescence,
Antibodies
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