| Revista: | Estudos de biologia |
| Base de datos: | PERIÓDICA |
| Número de sistema: | 000267165 |
| ISSN: | 0102-2067 |
| Autores: | Lorencetti, Tiago Tuleski1 Lopes, Priscila Hess Pereira, Elder Ribeiro Kizltyka, Viviane Pereira, Andre Zelanis Palitot Pereira, Luiz Fernando Elifio-Esposito, Selene Lobo |
| Instituciones: | 1Pontificia Universidade Catolica do Parana, Curitiba, Parana. Brasil |
| Año: | 2005 |
| Periodo: | Abr-Jun |
| Volumen: | 27 |
| Número: | 59 |
| Paginación: | 19-25 |
| País: | Brasil |
| Idioma: | Portugués |
| Tipo de documento: | Artículo |
| Enfoque: | Analítico, descriptivo |
| Resumen en inglés | Bothrops cotiara (GOMES, 1913) is found through São Paulo, Minas Gerais, Rio de Janeiro, Paraná and Santa Catarina. Diverse toxins from bothropic venoms have already been isolated. However, just a few data are found about B. cotiara toxins, in respect to its proteolytic activity. For this reason, the characterization of such activity becomes important. The proteolytic activity was investigated by kinetic assays using casein as substrate and by zymogram on SDS-PAGE with gelatine. Results showed low caseinolytic activity (7,5 U/ mg) in relation to those described for other Bothrops venoms, however, this low activity is verified in other species of the alternatus group. Zymogram presented intense proteolytic activity over gelatine characterized by proteins of aprox. 95 KDa, inhibited by the presence of 2-mercaptoetanol, divalent metal chelators as EDTA (10 mM) and partialy by serine-protease inhibitor, as PMSF (5 mM). Gel filtration chromatography performed on Sephadex G-100 column (130 x 2 cm) resulted in two peaks where isolation of the fraction with proteolytic activity was possible (P1). Such a fraction showed the same kinetcs by substract and temperature variation as crude venom. These results suggest the presence of a metaloprotease in the venom of B. cotiara, as described for other Bothrops species |
| Resumen en portugués | Bothrops cotiara (GOMES, 1913) pode ser encontrada desde São Paulo, Minas Gerais, Rio de Janeiro, Paraná e Santa Catarina. Diversas toxinas já foram isoladas de venenos botrópicos, mas pouco se sabe sobre enzimas proteolíticas obtidas a partir do veneno de B. cotiara. Por essa razão, a caracterização de tais moléculas se faz importante. A atividade proteolítica foi medida usando caseína como substrato e por zimograma em SDS-PAGE contendo gelatina. Os resultados mostraram baixa atividade caseinolítica (7,5 U/ mg) se comparada com a de outros venenos botrópicos, mas esta baixa atividade também é encontrada no veneno de outras espécies do grupo alternatus. O zimograma mostrou maior atividade por proteínas na faixa de aprox. 95 Kda que foi inibida totalmente por EDTA (10 mM) e parcialmente pelo inibidor de serinoprotease PMSF (5 mM). Cromatografia de filtração em gel de Sephadex G-100 (130 x 2 cm) resultou em dois picos principais, com atividade proteolítica apenas no primeiro (P1). Tal fração apresentou cinética enzimática pela variação do substrato e de temperatura semelhante ao veneno bruto. Os resultados sugerem a purificação parcial de uma metaloprotease |
| Disciplinas: | Química, Medicina |
| Palabras clave: | Bioquímica, Toxicología, Serpientes, Veneno, Purificación química, Metaloproteasas, Bothrops cotiara, Viperidae |
| Keyword: | Chemistry, Medicine, Biochemistry, Toxicology, Snakes, Venom, Chemical purification, Metalloproteases, Bothrops cotiara, Viperidae |
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