| Revista: | Cumbres |
| Base de datos: | PERIÓDICA |
| Número de sistema: | 000406154 |
| ISSN: | 1390-3365 |
| Autores: | Cabrera, O1 Pisonero, M1 Rodríguez, M1 Pérez, R1 González, E2 Pedroso, J1 García, D3 Cuello, M4 |
| Instituciones: | 1Instituto Finlay, Departamento de Análisis, La Habana. Cuba 2Instituto Finlay, Grupo de Anticuerpos Monoclonales, La Habana. Cuba 3Instituto Finlay, Dirección de Investigaciones, La Habana. Ecuador 4Universidad Técnica "Luis Vargas Torres", Facultad de Ingenierías y Tecnologías, Esmeraldas, Guayas. Ecuador |
| Año: | 2016 |
| Periodo: | Jul-Dic |
| Volumen: | 2 |
| Número: | 2 |
| Paginación: | 31-37 |
| País: | Ecuador |
| Idioma: | Español |
| Tipo de documento: | Artículo |
| Enfoque: | Aplicado, descriptivo |
| Resumen en español | Las autoridades regulatorias recomiendan el uso de técnicas inmunoquímicas para determinar la identidad de los antígenos presente en las vacunas conjugadas. Con el surgimiento de las vacunas multivalentes se ha hecho necesario el uso de técnicas inmunoquímicas con el empleo de anticuerpos monoclonales (AcM) para incrementar la sensibilidad de la determinación. El objetivo de este estudio fue establecer las condiciones analíticas que permitan utilizar el Dot Blot como técnica para determinar la identidad del polisacárido capsular de Streptococcus pneumoniae serotipo 14 (PsC 14) y del toxoide tetánico (TT) utilizada como proteína carrier en vacunas conjugadas multivalentes. AcMs contra el PsC 14 y el TT fueron utilizados, además fueron utilizados varios lotes de conjugados monovalentes del PsC 14, lotes de un candidato vacunal heptavalente contra el neumococo con TT como proteína transportadora y lotes de TT, todos producidos en el Instituto Finlay de Vacunas. Los resultados mostraron que para la determinación de la identidad antigénica fueron suficientes 10µL de muestras de los conjugados monovalentes en una dilución de 1/10 (vol/vol) e igual volumen para las vacunas heptavalentes. Quedó demostrado que a la concentración de 2µg/mL para el AcM contra el PsC 14 y a 2,5µg/mL para el AcM contra TT fueron suficientes para la determinación; mientras que los tiempos de incubación fueron ajustados a 37oC por 30 min. Como conclusiones de este trabajo podemos plantear que quedaron establecidas las condiciones de trabajo en el laboratorio para determinar la identidad del polisacárido capsular de S. pneumoniae serotipo 14 y para el toxoide tetánico en las vacunas conjugadas multivalentes por el método del Dot Blot |
| Resumen en inglés | Regulatory authorities recommend the use of immunochemical techniques to determine the identity of the antigens present on the conjugate vaccines. With the emergence of multivalent vaccines, it has become necessary to use immunochemical techniques using monoclonal antibodies to increase the sensitivity in the determination. The aim of this study was to establish the analytical conditions that would allow to use the Dot Blot as a technique to determine the identity of capsular polysaccharides from Streptococcus pneumoniae serotype 14 (PsC 14) and the tetanus toxoid (TT) used as carrier protein in multivalent conjugate vaccines. The MAb against the PsC 14 and TT were used; besides were used some batchs of monovalent conjugates of PsC 14; batchs of a heptavalent conjugate pneumococcal vaccine candidate with TT as carrier protein and batchs of TT, all produced at Finlay Institute of Vaccines. The results showed that for the determination of the antigenic identity were optimal volumes of 10µL of monovalent conjugate samples at a dilution of 1/10 (vol/vol) and equal volume for heptavalent vaccines. For MAb was demonstrated that 2µg/mL concentration of MAb against the PSC 14 and 2.5µg/ mL for MAb against TT were sufficient to successfully perform the determinations; while incubation times were adjusted at 37oC for 30min. The work allows us to conclude that working conditions in the laboratory were established to determine the identity of the capsular polysaccharides of S. pneumoniae serotype 14 and for tetanus toxoid as carrier protein in the heptavalent conjugate vaccines by Dot Blot method |
| Disciplinas: | Medicina, Química |
| Palabras clave: | Inmunología, Antígenos, Vacunas polivalentes, Pruebas de sensibilidad, Anticuerpos monoclonales, Toxoide tetánico, Streptococcus pneumoniae |
| Keyword: | Medicine, Chemistry, Immunology, Antigens, Polyvalent vaccines, Sensitivity tests, Monoclonal antibodies, Tetanus toxoid, Streptococcus pneumoniae |
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