Construcción y secuenciación parcial de una biblioteca sustractiva en Calcutta 4 (Musa AA) en estadio temprano de infección con Mycosphaerella fijiensis Morelet



Título del documento: Construcción y secuenciación parcial de una biblioteca sustractiva en Calcutta 4 (Musa AA) en estadio temprano de infección con Mycosphaerella fijiensis Morelet
Revista: Biotecnología vegetal
Base de datos: PERIÓDICA
Número de sistema: 000346435
ISSN: 1609-1841
Autores: 1
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Instituciones: 1Universidad Central "Marta Abreu" de Las Villas, Instituto de Biotecnología de las Plantas, Santa Clara, Villa Clara. Cuba
Año:
Periodo: Oct-Dic
Volumen: 6
Número: 4
Paginación: 213-217
País: Cuba
Idioma: Español
Tipo de documento: Artículo
Enfoque: Experimental, analítico
Resumen en español El estudio de los genes involucrados en la respuesta de defensa en la planta contra el ataque de patógenos, es uno de los pasos más importantes para la elucidación de los mecanismos moleculares de resistencia a enfermedades. La generación de bibliotecas sustractivas de ácido desoxirribonucleico complementario (ADNc), por medio de la técnica de hibridación sustractiva por supresión, ha sido utilizada para este propósito. En este trabajo se realizó una hibridación sustractiva, entre el ADNc obtenido de hojas de ‘Calcutta 4’ inoculadas con M. fijiensis (CCIBP-Pf83) y una mezcla de ADNc de hojas de ‘Calcutta 4’ no inoculadas y del micelio del hongo. Las muestras de hojas se tomaron a los 6, 10 y 12 días posteriores a la inoculación. La biblioteca sustractiva se obtuvo por clonación y transformación de los productos sustraídos y como resultado se obtuvieron 600 clones recombinantes. El análisis de secuencia de 69 clones reveló redundancia de las secuencias blanco expresadas, la mayoría no mostró homología con secuencias en las bases de datos. El 13 % tuvo alta homología con metalotioninas. Los resultados constituyen un paso de avance en el estudio a nivel molecular de la interacción Musa- Mycosphaerella fijiensis
Resumen en inglés The study of genes involved in plant defense response against pathogen attack, is one of most important steps leading to the elucidation of disease resistance molecular mechanisms. The generation of subtracted deoxyribonucleic acid libraries (cDNA), by means of suppression subtractive hybridization technique (SSH), has been used for this purpose. A subtractive hybridization was made between a cDNA population obtained from ‘Calcutta 4’ inoculated leaves with M. fijiensis (CCIBP-Pf83) and a mixture of cDNA from ‘Calcutta 4’ non inoculated leaves and mycelium. Leaves samples were taken at 6, 10 and 12 days after inoculation. The subtracted library was obtained by cloning and transformation of subtracted products and as a result, 600 recombinants clones were obtained. Sequence analysis of sixty nine clones, revealed redundancy of the expressed sequence tags and most of them showed no homology with reported sequences at databases and only 13 % had a high homology with metalothioneins. The results constitute a step in advance in the molecular study of Musa-Mycosphaerella fijiensis interaction
Disciplinas: Biología,
Agrociencias
Palabras clave: Genética,
Hongos,
Fitopatología,
Frutales,
Biotecnología,
Musa,
Plátano,
Mycosphaerella fijiensis,
Biblioteca genómica,
Secuencia génica,
Hibridación sustractiva
Keyword: Biology,
Agricultural sciences,
Fungi,
Genetics,
Fruit trees,
Phytopathology,
Biotechnology,
Musa,
Banana,
Mycosphaerella fijiensis,
Genomic library,
Gene sequence,
Substractive hybridization
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