A microanalytical variant of the SOS Chromotest for genotoxicological evaluation of natural and synthetic products



Título del documento: A microanalytical variant of the SOS Chromotest for genotoxicological evaluation of natural and synthetic products
Revista: Biotecnología aplicada
Base de datos: PERIÓDICA
Número de sistema: 000349595
ISSN: 0864-4551
Autores: 1
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3
1
1
Instituciones: 1Instituto Nacional de Oncología y Radiobiología, La Habana. Cuba
2Centro de Aplicaciones Tecnológicas y Desarrollo Nuclear, La Habana. Cuba
3Universidad de La Habana, Facultad de Biología, La Habana. Cuba
Año:
Volumen: 29
Número: 2
Paginación: 108-112
País: Cuba
Idioma: Inglés
Tipo de documento: Artículo
Enfoque: Experimental, aplicado
Resumen en español Los agentes que pueden dañar al ADN in vivo tienen la potencialidad de tener efectos adversos sobre la salud humana. Los mismos pueden inducir mutaciones transmisibles y cáncer. El ensayo SOS Chromotest es un ensayo basado en una fusión transcripcional de un gen SOS, sfi A y el gen de la β-galactosidasa, así la actividad enzimática indica el nivel de inducción de la respuesta SOS response y puede estimarse el daño al ADN producido por mutágenos físicos y químicos. Nosotros presentamos y evaluamos en este trabajo una variante microanalítica del ensayo SOS Chromotest original para la detección de la genotoxicidad de muestras pigmentadas. Introdujimos dos modificaciones principales: cambiamos sustratos que desarrollan color por otros que desarrollan fluorescencia y trabajamos a escala micro-analítica. La concentración óptima de sustrato para la β-galactosidasa utilizada fue de 1.8mM y el tiempo de reacción fue de 40 minutos. Esta variante detectó eficientemente la genotoxicidad de mutágenos conocidos y de extractos naturales pigmentados. Los resultados son discutidos en relación a las ventajas que ofrece trabajar a escala microanalítica, reducción de costos, automatización de las lecturas y su utilidad para tamizar una larga variedad de muestras
Resumen en inglés Agents that can damage the DNA in vivo have potential adverse effects on human health. They may induce transmissible mutations and cancer. SOS Chromotest is a SOS transcriptional-fusion based assay, β-galactosidase gene was located after a SOS promoter, thus its enzymatic activity indicates the level of induction of SOS response and the DNA damage produced by chemical and physical mutagens, can be estimated. We presented and evaluated a microanalytical variant of the original SOS Chromotest for detecting genotoxicity of pigmented samples. We introduced two main modifications: we changed the colorimetric substrates for fluorescent ones and we worked at micro-analytical scale. The optimal β-galactosidase substrate concentration used was 1.8 mM and 40 minutes as time reaction. This variant detected efficiently the genotoxicity of known mutagen and the natural pigmented extracts. The results are discussed in relation to the advantages to work at micronalytical scale, costs reduction, automatization of reading and its usefulness for the screening of a large variety of samples
Disciplinas: Medicina
Palabras clave: Toxicología,
Genética,
Genotoxicidad,
Pruebas de toxicidad
Keyword: Medicine,
Toxicology,
Genetics,
Genotoxicity,
Toxicity tests
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