Screening, production and biochemical characterization of a new fibrinolytic enzyme produced by Streptomyces sp. (Streptomycetaceae) isolated from Amazonian lichens



Título del documento: Screening, production and biochemical characterization of a new fibrinolytic enzyme produced by Streptomyces sp. (Streptomycetaceae) isolated from Amazonian lichens
Revista: Acta amazonica
Base de datos: PERIÓDICA
Número de sistema: 000396036
ISSN: 0044-5967
Autores: 1
3
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3
2
5
1
1
Instituciones: 1Universidade Estadual do Ceara, Rede Nordeste de Biotecnologia, Fortaleza, Ceara. Brasil
2Universidade Federal de Pernambuco, Laboratory of Immunopathology Keizo Asami, Recife, Pernambuco. Brasil
3Universidade Federal Rural de Pernambuco, Departamento de Morfologia e Fisiologia Animal, Recife, Pernambuco. Brasil
4Universidade do Minho, Instituto de Biotecnologia e Bioengenharia, Braga. Portugal
5Universidade Federal Rural de Pernambuco, Unidade Academica de Garanhuns, Garanhuns, Pernambuco. Brasil
Año:
Periodo: Sep
Volumen: 46
Número: 3
Paginación: 301-310
País: Brasil
Idioma: Inglés
Tipo de documento: Artículo
Enfoque: Analítico, descriptivo
Resumen en inglés Thrombosis is a pathophysiological disorder caused by accumulation of fibrin in the blood. Fibrinolytic proteases with potent thrombolytic activity have been produced by diverse microbial sources. Considering the microbial biodiversity of the Amazon region, this study aimed at the screening, production and biochemical characterization of a fibrinolytic enzyme produced by Streptomyces sp. isolated from Amazonian lichens. The strain Streptomyces DPUA1576 showed the highest fibrinolytic activity, which was 283 mm 2 . Three variables at two levels were used to assess their effects on the fibrinolytic production. The parameters studied were agitation (0.28 – 1.12 g ), temperature (28 – 36 ºC) and pH (6.0 – 8.0); all of them had significant effects on the fibrinolytic production. The maximum fibrinolytic activity (304 mm 2 ) was observed at 1.12 g , 28 ºC, and pH of 8.0. The crude extract of the fermentation broth was used to assess the biochemical properties of the enzyme. Protease and fibrinolytic activities were stable during 6 h, at a pH ranging from 6.8 to 8.4 and 5.8 to 9.2, respectively. Optimum temperature for protease activity ranged between 35 and 55 °C, while the highest fibrinolytic activity was observed at 45 ºC. Proteolytic activity was inhibited by Cu 2+ and Co 2+ ions, phenylmethylsulfonyl fluoride (PMSF) and pepstatin A, which suggests that the enzyme is a serine protease. Enzymatic extract cleaved fibrinogen at the subunits A α -chain, A β -chain, and γ -chain. The results indicated that Streptomyces sp. DPUA 1576 produces enzymes with fibrinolytic and fibrinogenolytic activity, enzymes with an important application in the pharmaceutical industry
Resumen en portugués A trombose é uma doença patofisiológica causada pelo acúmulo de fibrina no sangue. Proteases fibrinolíticas com potente atividade trombolítica são produzidas por diversas fontes microbianas. Considerando a biodiversidade microbiana da região amazônica, o presente estudo teve como objetivo a seleção, produção e caracterização bioquímica da enzima fibrinolítica de Streptomyces sp. isolado de líquens da Amazônia. Streptomyces DPUA1576 foi a melhor produtora com atividade fibrinolítica de 283 mm 2 . Três variáveis em dois níveis foram utilizadas para determinar as variáveis mais relevantes na produção da enzima fibrinolítica (FA). Os parâmetros estudados foram agitação (0.28 – 1.12 g ), temperatura (28 – 36 ºC ) e pH (6.0 – 8.0) e todos obtiveram efeitos significativos na produção fibrinolítica. A maior atividade fibrinolítica (304 mm 2 ) foi obtida a 1.12 g , 28 ºC e pH 8.0. O extrato bruto da fermentação foi usado para determinar as propriedades bioquímicas da enzima. Atividades proteásica e fibrinolítica foram estáveis durante 6 horas no intervalo de pH entre 6.8 – 8.4 e 5.8 – 9.2, respectivamente. Temperatura ótima para a atividade proteásica foi entre 35 – 55 °C, enquanto que para a atividade fibrinolítica foi de 45 ºC . Atividade proteásica foi inibida por íons Cu 2+ e Co 2+ , fluoreto de fenilmetilsulfonil e pepstatina A, na qual sugere que a enzima é uma serino-protease. O extrato enzimático degradou o fibrinogênio nas subunidades A α, A β e γ. Os resultados apresentados indicam que Streptomyces sp. DPUA 1576 produz enzimas com atividade fibrinolítica e fibrinogenolítica, enzimas com aplicações importantes na indústria farmacêutica
Disciplinas: Química,
Biología
Palabras clave: Bioquímica,
Fermentaciones,
Hongos,
Actinomycetes,
Proteasa fibrinolítica,
Inhibidores de la proteasa,
Actividad fibrinogenolítica
Keyword: Chemistry,
Biology,
Biochemistry,
Fermentation,
Fungi,
Actinomycetes,
Fibrinolytic protease,
Protease inhibitors,
Fibrinogenolytic activity
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