Validación de un método de determinación del polisacárido B residual en vesículas de membrana externa de Neisseria meningitidis
Título del documento: Validación de un método de determinación del polisacárido B residual en vesículas de membrana externa de Neisseria meningitidis
Revista: Vaccimonitor (La Habana)
Base de datos: PERIÓDICA
Número de sistema: 000335663
ISSN: 1025-028X
Autors: 1
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Institucions: 1Instituto Nacional de Oncología y Radiobiología, La Habana. Cuba
2Instituto Finlay, Centro de Investigación-Producción de Vacunas, La Habana. Cuba
Any:
Període: May-Ago
Volum: 19
Número: 2
Paginació: 18-33
País: Cuba
Idioma: Español
Tipo de documento: Artículo
Enfoque: Experimental, analítico
Resumen en español La Cromatografía Líquida de Alta Resolución-Fluorescencia ha resultado ser una herramienta sensible para la detección de trazas en productos farmacéuticos y es utilizada frecuentemente para la cuantificación de algunos polisacáridos de origen bacteriano que poseen ácido siálico como unidad repetitiva. En este trabajo nos planteamos como objetivo establecer y validar el método de HPLC–Fluorescencia, para determinar el contenido de polisacárido B residual en vesículas de membrana externa de Neisseria meningitidis. Para ello se realizó el montaje del método HPLC-FL, utilizando una columna de fase reversa C18 (Ultrasphere ODS, Beckman, USA) y se evaluaron seis lotes de vesículas de membrana externa de diferentes cepas Cu 385/83 y NZ 228. Se demostró que este método permitió la cuantificación de polisacárido B de una forma específica y exacta, y que cumplía con todos los parámetros de validación establecidos para un método de determinación de trazas mediante HPLC
Resumen en inglés The High-Resolution Liquid Chromatography-Fluorescence has proven to be a sensitive tool for trace detection in pharmaceuticals and it is frequently used for the quantification of some bacterial polysaccharides that have sialic acid as repeating unit. In this paper we aim at establishing and validating HPLC-fluorescence to determine polysaccharide content of residual B outer membrane vesicles from Neisseria meningitidis. We assembled the HPLC-FL method to the quantification of this residue, using a C18 reverse phase column (ODS UltraSphere, Beckman, USA). We evaluated six lots of outer membrane vesicles from different strains Cu 385/83 and NZ 228. It was demonstrated that the HPLC-FL method allows the quantification of polysaccharide B in a specific and exact manner, and that it complied with the validation parameters for a method for determining trace amounts by HPLC
Disciplines Medicina
Paraules clau: Microbiología,
Neisseria meningitidis,
Técnicas de laboratorio,
Polisacáridos,
Cromatografía líquida de alta resolución
Keyword: Medicine,
Microbiology,
Neisseria meningitidis,
Laboratory techniques,
Polysaccharides,
High performance liquid chromatography
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