| Revista: | Vaccimonitor (La Habana) |
| Base de datos: | PERIÓDICA |
| Número de sistema: | 000269026 |
| ISSN: | 1025-028X |
| Autors: | Pérez, José Luis1 Fernández, Yovania Aranguren, Yisabel Alvarez, Maylín Acevedo, Reynaldo Pérez, Oliver García, Luis |
| Institucions: | 1Instituto Finlay, Centro de Investigación-Producción de Vacunas, La Habana. Cuba |
| Any: | 2007 |
| Període: | Ene-Abr |
| Volum: | 16 |
| Número: | 1 |
| Paginació: | 17-22 |
| País: | Cuba |
| Idioma: | Español |
| Tipo de documento: | Artículo |
| Enfoque: | Aplicado, analítico |
| Resumen en español | El lipopolisacárido (LPS) de Vibrio cholerae O1, a diferencia de la mayoría de las bacterias gramnegativas, no es reactivo en el ensayo del KDO, un método ampliamente utilizado para la cuantificación de LPS. Este LPS puede ser cuantificado por peso seco cuando se trata del antígeno en estado puro, pero cuando se necesita cuantificarlo, por ejemplo en un proteoliposoma, se requieren métodos de hidrólisis fuerte para que la molécula de KDO se exponga y sea reactiva en el ensayo antes mencionado. En este trabajo describimos un método rápido, sencillo y reproducible que nos permite cuantificar el LPS en un proteoliposoma obtenido a partir de la superficie externa de V. cholerae O1, El Tor Ogawa, mediante el uso de un anticuerpo monoclonal anti-LPS Ogawa en Western blot y la posterior evaluación del perfil reactivo en un densitómetro, utilizando LPS Ogawa purificado y cuantificado por peso seco como patrón de referencia. Este método puede ser aplicado a cualquier otra preparación que contenga LPS y que no pueda ser evaluada por KDO |
| Resumen en inglés | Unlike most of the Gram-negative bacteria, Vibrio cholerae O1 lipopolysacharide (LPS), does not react in KDO assay, a widely used method for the quantification of these molecules. Vibrio cholerae O1 LPS can be quantified by dry weight when it is in pure state, but when it is part of a more complex structure as proteoliposomes, other methods such as strong hydrolysis are required for exposition of KDO molecule. In this paper, a rapid, simple and reproducible method for the quantification of LPS in a proteoliposome obtained from the external surface of Vibrio cholerae O1 El Tor Ogawa is described. The method consists in a Western blot assay using an anti- Ogawa LPS monoclonal antibody followed by the evaluation of the reactive profile by densitometry using a dry weight purified and quantified Ogawa LPS as reference pattern. This method can be applied to any other preparation containing LPS in which KDO method is not applicable |
| Disciplines | Medicina, Química |
| Paraules clau: | Microbiología, Bioquímica, Polisacáridos, Vibrio cholerae, Inmunoprecipitación, Vacunas |
| Keyword: | Medicine, Chemistry, Microbiology, Biochemistry, Polysaccharides, Vibrio cholerae, Immunoblot, Vaccines |
| Text complet: | Texto completo (Ver PDF) |
