Estandarización de una prueba de PCR-RFLP para la identificación de Rhodococcus rhodnii en insectos triatominos



Título del documento: Estandarización de una prueba de PCR-RFLP para la identificación de Rhodococcus rhodnii en insectos triatominos
Revista: Universitas scientiarum
Base de datos: PERIÓDICA
Número de sistema: 000269085
ISSN: 0122-7483
Autors: 1


2

Institucions: 1Pontificia Universidad Javeriana, Facultad de Ciencias, Bogotá. Colombia
2Instituto Nacional de Salud, Laboratorio de Parasitología, Bogotá. Colombia
Any:
Període: Jul
Volum: 12
Paginació: 11-22
País: Colombia
Idioma: Español
Tipo de documento: Artículo
Enfoque: Experimental, aplicado
Resumen en español Los triatominos son insectos de importancia en salud pública ya que transmiten el parásito Trypanosoma cruzi, agente causal de la enfermedad de Chagas. Estos insectos en su flora intestinal contienen bacterias del género Rhodococcus, las cuales establecen una relación simbiótica con el triatomino aportándole suplementos nutritivos necesarios para su normal desarrollo y crecimiento. El estudio de estas bacterias tiene gran interés debido tanto a la posibilidad de diseñar estrategias de control paratransgénico, como a las implicaciones de las interacciones que estas bacterias puedan desarrollar con los parásitos dentro del insecto. Dada la dificultad para identificar las bacterias del género Rhodococcus por pruebas tradicionales, en este trabajo se estandarizó una prueba de reacción en cadena de la polimerasa (PCR), seguida de un ensayo de longitud de polimorfismo de fragmentos de restricción para la identificación de Rhodococcus rhodnii aislado de Rhodnius prolixus. Para ello, se amplificó el gen codificante para el ARN 16 S ribosomal bacteriano y los productos obtenidos fueron secuenciados y sometidos a digestión con diversas enzimas de restricción. Los resultados demuestran la aplicabilidad de la prueba de PCR-RFLP para la identificación de R. rhodnii al encontrarse una total correspondencia en el número y tamaño de los fragmentos de restricción obtenidos in vitro e in silico
Resumen en inglés Triatomines are insects of great importance for public health because they transmit the parasite Trypanosoma cruzi, etiological agent of Chagas disease. These insects harbour intestinal symbiotic flora from the Rhodococcus genus, which provide the nutrients lacking in the insect diet, nutrients which are essential for normal insect development and growth. Study of these bacteria is of special interest due to the possibility of designing paratransgenesis control strategies as well as for implications that interactions between these bacteria and parasites can develop inside triatomine insects. Taking into account the difficulty in identifying bacteria from the Rhodococcus genus by traditional methods, in this work a polymerase chain reaction (PCR) followed by a restriction fragment length polymorphism analysis was standardized to identify Rhodococcus rhodnii isolated from Rhodnius prolixus. Gene coding for bacterial 16 S rRNA was amplified and obtained products were sequenced and digested with several restriction enzymes. Results show a total correlation between number and size of the restriction fragments obtained in vitro and in silico as well. Therefore, applicability of this PCR-RFLP assay for R. rhodnii identification has been demonstrated
Disciplines Medicina,
Biología
Paraules clau: Microbiología,
Bacterias,
Insectos,
Vectores biológicos,
Enfermedad de Chagas,
Simbiosis,
PCR,
Rhodococcus rhodnii,
Rhodnius prolixus,
Triatominae
Keyword: Medicine,
Biology,
Microbiology,
Bacteria,
Insects,
Biological vectors,
Chagas disease,
Symbiosis,
PCR,
Rhodococcus rhodnii,
Triatominae,
Rhodnius prolixus
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