| Revista: | Universitas scientiarum |
| Base de datos: | PERIÓDICA |
| Número de sistema: | 000355410 |
| ISSN: | 0122-7483 |
| Autors: | Rodíguez Pardo, Viviana Marcela1 Fuentes Lacouture, María Fernanda1 Aristizábal Castellanos, José Alejandro1 Vernot Hernández, Jean Paul2 |
| Institucions: | 1Pontificia Universidad Javeriana, Facultad de Ciencias, Bogotá. Colombia 2Universidad Nacional de Colombia, Facultad de Medicina, Bogotá. Colombia |
| Any: | 2010 |
| Volum: | 15 |
| Número: | 3 |
| Paginació: | 224-239 |
| País: | Colombia |
| Idioma: | Español |
| Tipo de documento: | Artículo |
| Enfoque: | Analítico, descriptivo |
| Resumen en español | La médula ósea (MO) es una fuente importante para el aislamiento de células “stem” mesenquimales (CSM) útiles en terapias de regeneración tisular e inmunomodulación. Objetivo. Aislar y caracterizar células “stem” mesenquimales obtenidas de MO según los criterios exigidos por la Sociedad Internacional de Terapia Celular. Materiales y métodos. Se recolectaron muestras de MO de donantes voluntarios que asistían al Servicio de Ortopedia del Hospital Universitario San Ignacio, Bogotá (Colombia). Se evaluaron las características m orfológicas por microscopia invertida y se determinó el inmunofenotipo por citometría de flujo. Se establecieron protocolos de inducción ad ipogénica, osteogénica y condrogénica mediante el uso de medios de cultivo de específicos y se evaluó la diferenciación utilizando tincion es de aceite rojo ‘O’, fosfatasa alcalina y safranina, respectivamente. Resultados. Se recolectaron 24 muestras de MO de pacientes sometidos a reemplazo total de cadera (volumen de muestra de MO: 5 - 45 ml). Se aislaron células con morfología fibroblastoide a partir de 21 muestras de MO (eficiencia de aislamiento: 87,5 %). En la determinación inmunofenotípica (CSM de MO) no existe diferencia estadísticamen te significativa entre los antígenos hematopoyéticos (CD34 y CD45, p>0,05). Entre el antígeno hematopoyético CD45 y los antígenos mesenquimales (CD13, CD44, CD73, CD90, CD105, HLA-I y HLA-DR) existe diferencia estadísticamente significativa (p=0.006). La tinción de aceite rojo ‘O’ reveló la presencia de adipocitos multiloculares, en la inducción osteogénica se observaron centros de mineralización y la condrogénesis fue positiva para la coloración con safranina. Conclusión. A partir de MO se aislaron satisfactoriamente y caracterizaron CSM según los criterios internacionales exigidos |
| Resumen en inglés | Bone marrow (BM) is an important source for isolating mesenchymal stem cells (MSC) useful in immunomodulation and tissue regeneration therapies. Objective. To isolate and characterize mesenchymal stem cells obtained from BM meeting the requirements of the International Society for Cellular Therapy. Materials and methods. BM samples were collected from volunteer donors attending the Orthopedics Service of the San Ignacio University Hospital (Bogotá, Colombia). Morphological cha racteristics were evaluated by inverted microscopy and the immunophenotype was determined by flow cytometry. Protocols were developed for adipogenic, osteogenic and chondrogenic differentiation using the Oil Red O, alkaline phosphatase and safranin stains, respecti vely. Results . We collected 24 samples of BM from patients with total hip replacement (volume of BM sample: 5-45 ml). Cells with a fibroblastoid morphology were isolated from 21 BM samples (isolation efficiency: 87.5%). No statistical significant differences were found between the hematopoyetic antigens (CD34 and CD45, p>0.05) in the immunophenotypic evaluation (of MSC from BM); on the contrary there were differences (p=0.006) between the hematopoyetic antigen CD45 and the mesenchymal antigens (CD13, CD44, CD73, CD90, CD105, HLA-I, and HLA-DR). Oil Red O stain revealed the presence of multilocular adipocytes, in the osteogenic induction we obs erved localized mineralization nodules, and chondrogenesis was positive as revealed by the safranin stain. Conclusion . MSC were satisfactorily isolated from BM and characterized according to the international standards |
| Resumen en portugués | A medula óssea (MO) é uma importante fonte para o isolamento de células-tronco mesenquimais (CTM) úteis na terapia de regeneração dos tecidos e imunomodulação. Objetivo. Isolar e caracterizar células-tronco mesenquimais obtidas de MO de acordo com os critérios exigidos pela Sociedade Internacional de Terapia Celular. Materiais e métodos. Foram coletadas amostras de MO de doadores voluntários que assistiram ao Serviço de Ortopedia do Hospital Universitário de São Ignacio, Bogotá (Colômbia). As características morfológicas foram avaliadas por microscopia invertida, e o imunofenótipo foi determinado por ci tometria de fluxo. Foram estabelecidos protocolos de indução adipogênica, osteogênica e condrogênica usando meios de cultura específicos e a diferenciação foi avaliada por meio da coloração com o “Oil Red O”, fosfatase alcalina e safranina, respectivamente. Resultados. Foram coletadas 24 amostras de MO em pacientes submetidos à artroplastia total do quadril (volume de amostra de OM: 5 - 45 ml). Foram isoladas células com morfologia fibroblastóide a partir de 21 amostras de MO (eficiência de isolamento: 87,5%). Na determinação immunofe notípica (CTM de MO), não existe diferença estatisticamente significativa entre os antigénios hematopoiéticos (CD34 e CD45, p>0,05). Ent re o antigénio hematopoiético CD45 e os antigénios mesenquimais (CD13, CD44, CD73, CD90, CD105, HLA-I e HLA-DR), existe diferença estatisticamente significativa (p =0,006). A coloração com o “Oil Red O” revelou a presença de adipócitos multiloculares, na in dução osteogénica observaram-se centros de mineralização e a condrogênese foi positiva para a coloração com safranina. Conclusão . A partir de MO foram isoladas satisfatoriamente e caracterizaram CTM segundo os critérios internacionais exigidos |
| Disciplines | Medicina |
| Paraules clau: | Hematología, Biología celular, Médula ósea, Citometría de flujo, Células troncales mesenquimatosas, Diferenciación celular, Técnicas de laboratorio |
| Keyword: | Medicine, Hematology, Cell biology, Bone marrow, Flow cytometry, Mesenchymal stem cells, Cell differentiation, Laboratory techniques |
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